[发明专利]一种抗病毒有效部位的提取纯化技术

权利要求书

1.一种抗病毒有效部位的提取纯化技术，其特征在于按如下步骤制备:

（1）取肾叶打碗花8重量份、垂盆草2重量份、黄蜀葵花1重量份，混匀粉碎成粗粉，用70%乙醇为溶剂提取3次，每次室温浸泡提取4小时，70%乙醇用量为药材总重量的12倍，滤过，合并滤液得提取液A；提取后的药渣再用30%乙醇为溶剂提取2次，每次加热回流提取1.5小时，30%乙醇用量为药材总重量的10倍，滤过，合并滤液得提取液B；提取后的药渣再用水为溶剂加热回流提取1.5小时，滤过，合并滤液得提取液E；

（2）将步骤（1）得到的提取液A在50℃减压浓缩，浓缩至密度为1.18的浓缩液A，将步骤（1）得到的提取液B在80℃减压浓缩，浓缩至密度为1.18的浓缩液B，将浓缩液A与浓缩液B合并，得浓缩液C；将步骤（1）得到的提取液E在80℃减压浓缩，浓缩至密度为1.12的浓缩液C；

（3）将步骤（2）得到的浓缩液C中加入95%乙醇，使乙醇重量占比70%，放置24小时，滤过，滤液在50℃减压浓缩，浓缩至无乙醇，得浓缩液D；

（4）将步骤（3）得到的浓缩液D通过MCI 凝胶色谱柱吸附，用水洗脱，洗脱量为5个色谱柱体积，水洗脱液弃去，再用体积比8:92、15:80、25:70的乙醇-水依次洗脱，合计洗脱量为15个色谱柱体积，洗脱液直接通过与MCI 凝胶色谱柱相同色谱柱体积的硅胶色谱柱干柱，收集通过硅胶色谱柱干柱的第4-10色谱柱体积的流出液，回收溶剂，低温干燥得提取物A；

（5）将步骤（2）得到的浓缩液C加体积比1:8乙酸乙酯-氯仿萃取3次，合并萃取液，放置8小时，滤过，滤液回收溶剂，低温干燥，即得提取物B；

（6）将步骤（5）得到的提取物B通过MCI 凝胶色谱柱吸附，用水洗脱，洗脱量为5个色谱柱体积，水洗脱液弃去，再用体积比23:77的乙醇-水洗脱，洗脱量为10个色谱柱体积，洗脱液直接通过与MCI 凝胶色谱柱相同色谱柱体积的硅胶色谱柱干柱，收集通过硅胶色谱柱干柱第5-10色谱柱体积的的流出液，回收溶剂，低温干燥，得提取物F；

（7）将步骤（4）得到的提取物A与步骤（6）得到的提取物F合并，即得抗病毒有效部位。

2.根据权利要求1所述一种抗病毒有效部位的提取纯化技术，其特征在于所述的抗病毒有效部位同时含有肾叶打碗花素V、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、异鼠李素-3,7-二-O-β-D-葡萄糖苷、异槲皮苷。

3.根据权利要求1所述一种抗病毒有效部位的提取纯化技术，其特征在于用该提取纯化技术得到的抗病毒有效部位中肾叶打碗花素V、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、异鼠李素-3,7-二-O-β-D-葡萄糖苷及异槲皮苷的总含量占总有效部位的55%以上。

4.根据权利要求1所述一种抗病毒有效部位的提取纯化技术，其特征在于用该提取纯化技术得到的抗病毒有效部位可以用于制备抗病毒药物。

5.一种抗病毒有效部位，其特征在于同时含有肾叶打碗花素V、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、异鼠李素-3,7-二-O-β-D-葡萄糖苷、异槲皮苷。

6.根据权利要求5所述一种抗病毒有效部位，其特征在于抗病毒有效部位中肾叶打碗花素V、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、肾叶打碗花素、异鼠李素-3,7-二-O-β-D-葡萄糖苷及异槲皮苷的总含量占总有效部位的55%以上。