[发明专利]检测翻译后修饰蛋白质与其配体间相互作用的成套试剂有效
申请号: | 201810455238.1 | 申请日: | 2018-05-14 |
公开(公告)号: | CN109917120B | 公开(公告)日: | 2022-10-28 |
发明(设计)人: | 李丕龙;李剑;王静;周敏;李维平;王亮;吴荣波;陈鹤 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/68 |
代理公司: | 北京市海问律师事务所 11792 | 代理人: | 侯宝光;廖雅静 |
地址: | 100084 北京市海淀区北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 翻译 修饰 蛋白质 与其 配体间 相互作用 成套 试剂 | ||
1.用于检测名称为X的蛋白质与名称为XL的带有修饰的蛋白质间是否具有相互作用的成套试剂,由名称分别为A、B、C和D的四种试剂组成;
所述A由名称为R的生物分子和所述X连接而成;
所述B含有名称为L的生物分子;
所述R与所述L相同或不同且二者间具有相互作用,所述R与所述L相互作用后发生相变;
所述C为由C单体形成的多聚体,所述C单体为下述cl)或c2):
cl)由名称为mc的单体、名称为甲的报告基团和名称为YC的生物分子连接得到的分子,大于等于两个的所述mc能形成多聚体;
c2)在cl)上连接标签得到的分子;
所述D由所述XL和名称为YD的生物分子连接而成;
所述YC与所述YD间具有相互作用;所述YC与所述YD均为蛋白质;
所述R为蛋白质,所述L为蛋白质;
通过测定在所述A中的R与所述B中的L互作发生相变产生的相变液滴中是否含有所述甲的信号,来确定所述X与所述XL间是否具有相互作用。
2.根据权利要求1所述的成套试剂,其特征在于:所述YC为Y11)或Y13):
Y11)氨基酸序列是序列7的第362~465位所示的蛋白质;
Y13)在Y11)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质;
和/或,所述YD为Y21)或Y23):
Y21)氨基酸序列是序列11的第22~29位所示的蛋白质;
Y23)在Y21)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。
3.根据权利要求1或2所述的成套试剂,其特征在于:所述R含有名称为结合区1的结合区;所述L含有名称为结合区2的结合区;所述R与所述L间的相互作用通过所述结合区1和所述结合区2进行,所述R中所述结合区1和所述L中所述结合区2的个数均大于等于2。
4.根据权利要求1或2所述的成套试剂,其特征在于:所述A中还连接有名称为乙的报告基团;
和/或,所述B中还连接有名称为丙的报告基团。
5.根据权利要求4所述的成套试剂,其特征在于:所述乙和所述丙相同或不同;
和/或,所述甲不同于所述乙和所述丙。
6.根据权利要求5所述的成套试剂,其特征在于:所述甲、所述乙和所述丙均为荧光报告基团。
7.根据权利要求6所述的成套试剂,其特征在于:所述荧光报告基团为荧光蛋白质。
8.根据权利要求1或2中任一所述的成套试剂,其特征在于:所述A中所述X和所述R的个数比为大于等于1的整数。
9.根据权利要求1或2中任一所述的成套试剂,其特征在于:所述R为由R单体形成的多聚体,所述R单体均含有名称为mr的单体,大于等于两个的所述mr能形成多聚体;
和/或,所述L为由L单体形成的多聚体,所述L单体均含有名称为ml的单体,大于等于两个的所述ml能形成多聚体;
所述mc、所述mr与所述ml相同或至少两个相同或彼此间均不同。
10.根据权利要求9所述的成套试剂,其特征在于:
所述R中至少有一个单体含有结合区1;
和/或,所述L中至少有一个单体含有结合区2;
所述R与所述L间的相互作用通过所述结合区1和所述结合区2进行。
11.根据权利要求9所述的成套试剂,其特征在于:所述R单体均含有所述mr和结合区1;
和/或,所述L单体均含有所述ml和结合区2;
所述R与所述L间的相互作用通过所述结合区1和所述结合区2进行。
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