[发明专利]检测翻译后修饰蛋白质与其配体间相互作用的成套试剂有效

专利信息
申请号: 201810455238.1 申请日: 2018-05-14
公开(公告)号: CN109917120B 公开(公告)日: 2022-10-28
发明(设计)人: 李丕龙;李剑;王静;周敏;李维平;王亮;吴荣波;陈鹤 申请(专利权)人: 清华大学
主分类号: G01N33/53 分类号: G01N33/53;G01N33/68
代理公司: 北京市海问律师事务所 11792 代理人: 侯宝光;廖雅静
地址: 100084 北京市海淀区北京*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 检测 翻译 修饰 蛋白质 与其 配体间 相互作用 成套 试剂
【权利要求书】:

1.用于检测名称为X的蛋白质与名称为XL的带有修饰的蛋白质间是否具有相互作用的成套试剂,由名称分别为A、B、C和D的四种试剂组成;

所述A由名称为R的生物分子和所述X连接而成;

所述B含有名称为L的生物分子;

所述R与所述L相同或不同且二者间具有相互作用,所述R与所述L相互作用后发生相变;

所述C为由C单体形成的多聚体,所述C单体为下述cl)或c2):

cl)由名称为mc的单体、名称为甲的报告基团和名称为YC的生物分子连接得到的分子,大于等于两个的所述mc能形成多聚体;

c2)在cl)上连接标签得到的分子;

所述D由所述XL和名称为YD的生物分子连接而成;

所述YC与所述YD间具有相互作用;所述YC与所述YD均为蛋白质;

所述R为蛋白质,所述L为蛋白质;

通过测定在所述A中的R与所述B中的L互作发生相变产生的相变液滴中是否含有所述甲的信号,来确定所述X与所述XL间是否具有相互作用。

2.根据权利要求1所述的成套试剂,其特征在于:所述YC为Y11)或Y13):

Y11)氨基酸序列是序列7的第362~465位所示的蛋白质;

Y13)在Y11)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质;

和/或,所述YD为Y21)或Y23):

Y21)氨基酸序列是序列11的第22~29位所示的蛋白质;

Y23)在Y21)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。

3.根据权利要求1或2所述的成套试剂,其特征在于:所述R含有名称为结合区1的结合区;所述L含有名称为结合区2的结合区;所述R与所述L间的相互作用通过所述结合区1和所述结合区2进行,所述R中所述结合区1和所述L中所述结合区2的个数均大于等于2。

4.根据权利要求1或2所述的成套试剂,其特征在于:所述A中还连接有名称为乙的报告基团;

和/或,所述B中还连接有名称为丙的报告基团。

5.根据权利要求4所述的成套试剂,其特征在于:所述乙和所述丙相同或不同;

和/或,所述甲不同于所述乙和所述丙。

6.根据权利要求5所述的成套试剂,其特征在于:所述甲、所述乙和所述丙均为荧光报告基团。

7.根据权利要求6所述的成套试剂,其特征在于:所述荧光报告基团为荧光蛋白质。

8.根据权利要求1或2中任一所述的成套试剂,其特征在于:所述A中所述X和所述R的个数比为大于等于1的整数。

9.根据权利要求1或2中任一所述的成套试剂,其特征在于:所述R为由R单体形成的多聚体,所述R单体均含有名称为mr的单体,大于等于两个的所述mr能形成多聚体;

和/或,所述L为由L单体形成的多聚体,所述L单体均含有名称为ml的单体,大于等于两个的所述ml能形成多聚体;

所述mc、所述mr与所述ml相同或至少两个相同或彼此间均不同。

10.根据权利要求9所述的成套试剂,其特征在于:

所述R中至少有一个单体含有结合区1;

和/或,所述L中至少有一个单体含有结合区2;

所述R与所述L间的相互作用通过所述结合区1和所述结合区2进行。

11.根据权利要求9所述的成套试剂,其特征在于:所述R单体均含有所述mr和结合区1;

和/或,所述L单体均含有所述ml和结合区2;

所述R与所述L间的相互作用通过所述结合区1和所述结合区2进行。

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