[发明专利]一种人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变蛋白及其应用

说明书

本发明涉及一种人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变蛋白及其应用，通过将大量糖尿病、高血压与肺癌患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3的突变蛋白，根据该人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3的突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为糖尿病、高血压与肺癌的基因诊断提供指引作用，并为相关疾病的诊断和治疗提供一定的理论基础。

技术领域

本发明涉及一种基因工程领域，尤其涉及一种人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变蛋白及其应用。

背景技术

线粒体中的丙酮酸脱氢酶复合体(pyruvate dehydrogenase Complex,PDC)能够催化丙酮酸氧化脱羧生成NADH和乙酰辅酶A，并把糖酵解与三羧酸循环以及ATP的生成紧密地联系在一起。这一重要反应对于需要大量ATP的组织来说至关重要。通过PDC产生的乙酰辅酶A对于肝脏、脂肪这样能够产生脂肪的组织来说也是非常重要的。丙酮酸脱氢酶激酶(Pyruvatedehydrogenase kinase,PDK)通过磷酸化PDC抑制其活性，限制了丙酮酸被完全氧化或转变成脂肪酸。

人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3发生突变会对人类健康造成严重影响。在对某些疾病，尤其是糖尿病、高血压与肺癌患者的外周血进行基因测序的过程中，均发现患者的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3发生了突变，因此，对人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变的检测对判断人体是否患有相关疾病具有一定的指引作用。

发明内容

本发明目的在于提供一种人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变蛋白及其应用。

本发明技术方案包括：

第一方面，提供一种人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

第二方面，提供一种人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变蛋白的编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

第三方面，提供一种基因芯片，包括：固相载体和固定在该载体上的核苷酸探针；所述核苷酸探针根据上述所述人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变蛋白的核苷酸序列，与人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3正常蛋白的核苷酸序列的比对结果确定。

优选地，所述核苷酸探针为SEQ ID NO:3所示的碱基序列。

第四方面，提供一种特异性识别人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变蛋白的单克隆抗体，其可与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列特异性结合。

第五方面，提供一种用于检测人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变蛋白的抗体的ELISA试剂盒，所述ELISA试剂盒包括：包被有上述单克隆抗体的ELISA酶标板、酶标二抗、检测对象的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3蛋白、样品稀释液、包被缓冲液、ELISA酶标板洗涤液、显色液和终止液。

优选地，所述酶标二抗为稀释的HRP辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG。

本发明提供了一种人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变蛋白及其应用，将大量糖尿病、高血压与肺癌患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3的突变蛋白，根据该人的丙酮酸脱氢酶激酶同工酶3突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为糖尿病、高血压与肺癌的基因诊断提供指引作用，为相关疾病的诊断和治疗提供一定的理论基础。

上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例并配合附图详细说明如后。

附图说明

图1是本发明实施例一提供的一种比对结果示意图；

图2是本发明实施例一提供的另一种比对结果示意图；