[发明专利]由牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化的方法和组合物及应用在审
申请号: | 201810456039.2 | 申请日: | 2018-05-14 |
公开(公告)号: | CN108588016A | 公开(公告)日: | 2018-09-28 |
发明(设计)人: | 王帅 | 申请(专利权)人: | 王帅 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 唐致明 |
地址: | 518172 广东省深圳市龙岗区龙岗大道龙*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 牙髓干细胞 细胞分化 牙齿骨 信号通路抑制剂 应用 药物组合物 有效地 分化 科研 | ||
本发明公开了一种由牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化的方法和组合物及应用,通过在牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化的过程中,加入Wnt信号通路抑制剂和/或TGF‑β信号通路抑制剂,能够有效地提高牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化的效率,包含Wnt信号通路抑制剂和/或TGF‑β信号通路抑制剂的药物组合物在牙髓干细胞分化方面具有较好的应用前景,具有重大的科研价值。
技术领域
本发明涉及干细胞分化领域,尤其是涉及一种由牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化的方法和组合物及应用。
背景技术
牙髓干细胞是由牙髓组织中分离出的纤维状细胞,具有多向分化的潜能,除了能形成矿化结节能力的细胞外,经过不同细胞因子的诱导,还能够分化成脂肪、骨、软骨、肌肉、神经等。牙齿骨细胞分为牙源性上皮细胞和牙源性间充质细胞,其能够进一步形成牙齿样结构。牙齿属于不可再生的咀嚼器官,因此对牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化的研究具有重大的意义和科研价值。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种由牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化的方法和组合物及应用。
本发明所采取的技术方案是:
本发明提供一种提高牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化效率的方法,所述方法包括:在牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化的过程中,加入Wnt信号通路抑制剂和/或TGF-β信号通路抑制剂。
优选地,在分化的第1~3天内加入Wnt信号通路抑制剂和/或TGF-β信号通路抑制剂。
优选地,加入的Wnt信号通路抑制剂的浓度为0.5~2μM;加入的TGF-β信号通路抑制剂的浓度为5~20μM。
优选地,在牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化的过程中,加入Wnt信号通路抑制剂和TGF-β信号通路抑制剂。
优选地,在分化的第1~3天加入TGF-β信号通路抑制剂作用48h以上。
优选地,所述牙髓干细胞为来自于哺乳动物的牙髓干细胞。
本发明还提供一种提高牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化效率的药物组合物,包含Wnt信号通路抑制剂和/或TGF-β信号通路抑制剂。
Wnt信号通路抑制剂和/或TGF-β信号通路抑制剂在制备提高牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化效率的药物组合物中的应用。
在一些具体实施例中,所述Wnt信号通路抑制剂为SC252928;所述TGF-β信号通路抑制剂为SB431542。
本发明的有益效果是:
由牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化的路径会涉及多个细胞信号通路的作用,本发明通过大量研究发现通过抑制Wnt信号通路和/或TGF-β信号通路能够提高牙髓干细胞向牙齿骨细胞分化的效率,在牙髓干细胞的定向分化研究方面具有重大的应用前景。
附图说明
图1为实施例1中对照组和实验组的培养方式图;
图2为实施例1中不同牙齿骨细胞特异性表达基因的表达能力图;
图3为实施例2不同抑制剂处理时间对牙髓干细胞分化影响实验的实验组培养方式图;
图4为实施例2中抑制剂在处理时间处理后的ALP表达能力图;
图5为实施例2功能性验证实验中的培养方式图;
图6为实施例2功能性验证实验骨钙化结节生成图;
图7为实施例2功能性验证实验骨钙化结节染色图;
图8为实施例3信号通路激活剂对骨分化的影响实验的培养方式图;
图9为实施例3信号通路激活剂对骨分化的影响实验的ALP表达能力图;
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