[发明专利]一种人的磷脂酶D42突变蛋白及其应用

说明书

本发明涉及一种人的磷脂酶D42突变蛋白及其应用，将若干白血病患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的磷脂酶D42的突变蛋白，根据该人的磷脂酶D42突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为白血病的基因诊断提供指引作用，实现白血病的诊断和治疗。

技术领域

本发明涉及一种基因工程领域，尤其涉及一种人的磷脂酶D42突变蛋白及其应用。

背景技术

磷脂酶D(phospholipase D，PLD)是调控机体磷脂代谢的重要酶类，近年来大量研究表明，PLD与细胞增殖和肿瘤形成密切相关。PLD在多种恶性肿瘤中表达和活性增高并促进肿瘤的增生和浸润；PLD水解产生磷脂酸作为推动肿瘤发生的第二信使，在涉及癌症的重要信号通路网中居于中心地位。近期研究发现，磷脂酶D42(phospholipase D4isoform 2)在白血病发生发展中的作用机制与白血病的预防和治疗密切相关，并可能成为白血病治疗的新靶点，因此，对人的磷脂酶D42的检测对判断人体是否白血病有一定的指引作用。

发明内容

本发明目的在于提供一种人的磷脂酶D42突变蛋白及其应用。

本发明技术方案包括：

第一方面，提供一种人的磷脂酶D42突变蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

第二方面，提供一种人的磷脂酶D42的突变蛋白的编码基因，其核苷酸序列如SEQID NO:2所示。

第三方面，提供一种基因芯片，包括：固相载体和固定在该载体上的核苷酸探针；所述核苷酸探针根据上述所述人的磷脂酶D42突变蛋白的核苷酸序列，与人的磷脂酶D42正常蛋白的核苷酸序列的比对结果确定。

优选地，所述核苷酸探针为SEQ ID NO:3所示的碱基序列。

第四方面，提供一种特异性识别人的磷脂酶D42突变蛋白的单克隆抗体，其可与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列特异性结合。

第五方面，提供一种用于检测人的磷脂酶D42突变蛋白的抗体的ELISA试剂盒，所述ELISA试剂盒包括：包被有上述单克隆抗体的ELISA酶标板、酶标二抗、检测对象的磷脂酶D42蛋白、样品稀释液、包被缓冲液、ELISA酶标板洗涤液、显色液和终止液。

优选地，所述酶标二抗为稀释的HRP辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG。

本发明提供了一种人的磷脂酶D42突变蛋白及其应用，将若干白血病患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的磷脂酶D42的突变蛋白，根据该人的磷脂酶D42突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为白血病的基因诊断提供指引作用，实现白血病的诊断和治疗。

上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例并配合附图详细说明如后。

附图说明

图1是本发明实施例一提供的一种比对结果示意图；

图2是本发明实施例一提供的一种基因芯片布局图；

图3是本发明实施例二提供的一种显色结果示意图；

图4是本发明实施例二提供的另一种显色结果示意图；

图5是本发明实施例五提供的为蛋白含量的标准曲线；

图6是本发明实施例五提供的Western blot检测结果示意图。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。