[发明专利]一种小肠结肠炎耶尔森氏菌的显色培养基及其应用

说明书

本发明公开了一种小肠结肠炎耶尔森氏菌的显色培养基及其应用，培养基中含有胰蛋白胨、酵母浸出粉、阿拉伯糖、山梨醇、去氧胆酸钠、丙酮酸钠、三号胆盐、氯化钠、五水合硫代硫酸钠、精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸、七水硫酸镁、中性红。该显色培养基可用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的快速检测试剂盒和快速检测板的制备。本发明中提供的显色培养基及快速检测试剂盒、快速检测板可实现不同样品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的快速检测，操作简单，灵敏度高。

技术领域

本发明属于微生物检测领域，涉及微生物显色培养基，还涉及用显色培养基制作的快速检测板和检测试剂盒。

背景技术

小肠结肠炎耶尔森氏菌是一种革兰氏阴性杆菌或球菌，广泛存在于自然界如湖泊、土壤和植被及家禽、家畜和其他动物中，并可通过多种途径传播，由小肠结肠炎耶尔森氏菌引起的临床症状主要表现为急性腹痛、腹泻、呕吐等肠胃现象及结节性红斑、关节炎、骨髓炎、肝炎败血症等并发症。

传统检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的方法包括增菌培养、理化鉴定、血清分析等一系列复杂过程，且这种方法适用于设备齐全的检测实验室中所用，存在检测周期长，实验准备材料时间长，不能满足食品安全检验市场大批量检验需求。随着技术的发展多种分子生物学方法也被应用到小肠结肠炎耶尔森氏菌快速检测中，比如通过检测相关基因来定性分析，或是胶体金免疫法，此类方法检测成本高，设备要求昂贵，并且对检测人员的操作有一定的技术要求，在食品原材料检验市场推广尚有较大难度。

CN105203766A中公开了一种致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌测试条，将免疫反应的特异性、层析方法的快速性及彩色乳胶颗粒作为示踪物的直观性等优点结合在一起，有效解决了现有技术检测方法费时、繁琐、特异性差的问题。但是测试条的制备方法比较复杂，包括制备纯化单克隆抗体、制备活化乳胶颗粒、制备标记物、包被硝酸纤维膜、测试条组装等步骤，成本较高，对制作人员有一定的技术要求，不利于测试条的大规模推广应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种小肠结肠炎耶尔森氏菌的显色培养基及其快速检测板和检测试剂盒。

本发明所采取的技术方案是：

一种小肠结肠炎耶尔森氏菌的显色培养基，每1L培养基中含有胰蛋白胨5～20g、酵母浸出粉1～8g、阿拉伯糖1～10g、山梨醇0.5～5g、去氧胆酸钠5～20g、丙酮酸钠0.5～3g、三号胆盐2～12g、氯化钠1～10g、五水合硫代硫酸钠1～8g、精氨酸1～10g、赖氨酸1～10g、鸟氨酸1～10g、七水硫酸镁0.01～0.05g、中性红0.01～0.05g，显色培养基的pH值为6.8～7.6。

进一步地，每1L培养基中含有胰蛋白胨5～20g、酵母浸出粉5～8g、阿拉伯糖5～10g、山梨醇3～5g、去氧胆酸钠5～10g、丙酮酸钠1～3g、三号胆盐2～8g、氯化钠1～5g、五水合硫代硫酸钠2～5g、精氨酸1～5g、赖氨酸1～5g、鸟氨酸1～5g、七水硫酸镁0.01～0.05g、中性红0.02～0.05g，显色培养基的pH值为6.8～7.6。

一种小肠结肠炎耶尔森氏菌的快速检测试剂盒，含有选择性增菌液和本发明中所述的显色培养基。

进一步地，每1L选择性增菌液中含有胰蛋白胨1～12g、乳糖5～20g、草酸钠1～5g、山梨醇0.5～5g、丙酮酸钠1～5g、氯化钠1～10g、脱氧胆酸钠1-5g、抗生素0.15～0.5g，选择性增菌液pH值为6.8～7.6。

进一步地，每1L选择性增菌液中含有胰蛋白胨6～12g、乳糖15～20g、草酸钠3～5g、山梨醇3～5g、丙酮酸钠1～4g、氯化钠4～6g、脱氧胆酸钠3～5g、抗生素0.15～0.2g，选择性增菌液pH值为6.8～7.6。

进一步地，抗生素包含头孢磺啶钠、头孢他啶、头孢唑肟、头孢哌酮钠、头孢曲松钠、新生霉素和两性霉素。