[发明专利]一种提取华贵栉孔扇贝“南澳金贝”体内总类胡萝卜素的改良方法

说明书

本发明涉及一种提取华贵栉孔扇贝“南澳金贝”体内总类胡萝卜素的改良方法，主要包括：(1)样品制备：取华贵栉孔扇贝“南澳金贝”的闭壳肌组织，真空冷冻干燥48h，研磨成粉得到样品；(2)超声波辅助提取总类胡萝卜素：准确称取步骤(1)的样品，置于具盖的离心管中，加入丙酮溶剂后，置于超声波破碎仪中，于超声波强度100‑1000W/m²、20KHZ、20‑40℃下避光提取，时间少于30min，然后5000rpm离心5min，获得上层总类胡萝卜素提取液；(3)总类胡萝卜素含量测定：准确移取步骤(2)中的提取液0.1‑1mL至比色皿中，然后在紫外可见分光光度计上于波长452nm处测定吸光值。本发明所需时间少于30min、提取量是传统方法的1.28倍，且丙酮用量仅为传统方法的50％，具有快速、高效、节约等优点。

技术领域

本发明涉及一种提取贝类体内总类胡萝卜素的方法，尤其涉及一种提取华贵栉孔扇贝“南澳金贝”体内总类胡萝卜素的改良方法。

背景技术

华贵栉孔扇贝Chlamys nobilis Reeve是一种海产双壳贝类，以营养丰富、味道鲜美、肉质细嫩而著称，其闭壳肌制成的干品俗称“干贝”，是著名的海产八珍之一。自上世纪70年代末以来，华贵栉孔扇贝已成为我国南方海域重要的海水养殖贝类。华贵栉孔扇贝“南澳金贝”是汕头大学经过4代人工定向选育和2代示范养殖培育的国家级水产新品种(品种登记号：GS-01-009-2014)。这个新品种具有“三高一强”四大优良特点：1、感官品质高(贝壳、闭壳肌、外套膜均为金黄色)；2、营养价值高(肌肉组织的总类胡萝卜素含量是普通养殖种的 10.80-28.95倍)；3、养殖效益高(比普通养殖种亩产值高6000-9000 元)；4、抗逆性强(总抗氧化能力是普通养殖种的1.34-3.53倍、10℃时的低温耐受率是普通养殖种的2.95倍)。目前，华贵栉孔扇贝“南澳金贝”已经在广东、海南以及福建等地开展养殖，广受扇贝养殖业者和消费者的喜爱，已成为我国南方扇贝养殖产业的新宠。

类胡萝卜素(carotenoids)是由高等植物、藻类、真菌等合成的一类广泛存在于自然界中的从浅黄色到深红色的色素。类胡萝卜素不仅能够提高动物产品的感官品质，而且还能预防心血管疾病、癌症、老年性黄斑病变、骨质疏松症及眼疾等，对人类和动物的健康具有重要作用。目前类胡萝卜素已广泛应用于食品、化妆品和保健品等领域。

传统方法提取华贵栉孔扇贝体内类胡萝卜素步骤如下：1、样品制备：获取华贵栉孔扇贝闭壳肌组织，真空冷冻干燥48h，研磨成粉、得到样品。2、丙酮溶剂萃取：取0.4g样品置于10ml具盖离心管中，加入4mL丙酮溶剂于室温25℃下避光、200rpm震荡萃取1h，取上层提取液移至新的具盖离心管中；再向原离心管中加入4mL丙酮溶剂于室温25℃下避光、200rpm震荡再次萃取1h，之后5000rpm离心5min，取上层提取液与第一次提取液合并。3、总类胡萝卜素含量测定：准确移取步骤2中的提取液0.2mL至1mL的比色皿中，然后在紫外可见分光光度计上于波长452nm处测定吸光值，根据Foss et al.(1984)方法计算样品中的总类胡萝卜素含量。该方法耗时至少2h、所需丙酮溶剂8ml。

鉴于类胡萝卜素对人类和动物健康的作用，为了更有效地开发、利用华贵栉孔扇贝“南澳金贝”体内的类胡萝卜素，因此，需要对传统的华贵栉孔扇贝类胡萝卜素提取方法进行改进。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种提取华贵栉孔扇贝“南澳金贝”体内总类胡萝卜素的改良方法。

一种提取华贵栉孔扇贝“南澳金贝”体内总类胡萝卜素的改良方法，主要包括以下步骤：

(1)样品制备：采用传统方法制备样品(Zheng et al.,2010)，具体为：获取华贵栉孔扇贝“南澳金贝”闭壳肌组织，真空冷冻干燥 48h，研磨成粉、得到样品。