[发明专利]一种自组装凝血酶的酯化微孔止血淀粉的制备方法及其应用

说明书

本发明涉及一种自组装凝血酶的酯化微孔止血淀粉的制备方法及其应用，将微孔淀粉与三偏磷酸钠在碱性条件下加热反应，得到表面具有淀粉磷酯的酯化微孔淀粉，将酯化微孔淀粉与凝血酶水溶液混合后低温干燥，得到自组装凝血酶的酯化微孔止血淀粉。本发明涉及的止血淀粉，具有较大的表面积，较高的表面负电荷性，能够通过氢键稳定地结合大量凝血酶。第二，本发明涉及的止血淀粉能快速大量地吸入血液，聚集并活化血小板，达到快速止血的效果。第三，本发明涉及的止血淀粉没有生物毒性，并能够被组织细胞快速降解吸收。

技术领域

本发明涉及利用α淀粉酶和葡萄糖淀粉酶酶解玉米淀粉得到微孔淀粉，使用三偏磷酸钠酯化微孔淀粉并自组装凝血酶的制备方法。及其在创口止血中的应用。具体涉及用三偏磷酸钠酯化微孔淀粉，并自组装凝血酶的止血淀粉的制备，以及该方法用于体表及体内伤口出血止血中的应用。。

背景技术

众所周知，在创伤后减少失血量对于生命来说是至关重要的，同时也可以减少凝血病、感染和多系统器官衰竭导致的死亡风险。传统意义上的止血方法是用纱布和缝合材料与止血剂结合使用的；然而，这些方法虽然可以应用于小出血，但对于控制大量出血来说，尤其是在心脏、肝脏和肾脏等器官上的止血，它们的止血效率是不高的。因此，寻找一种高效率的止血材料是至关重要的。理想的止血材料应该能在短时间内控制不同程度的出血，并具有良好的血液相容性、生物相容性和生物降解性。因此，从现有的条件来看，在自然界中寻找优良的生物、植物材料加以改进成为止血材料是一种理想的选择。

微孔淀粉是一种具有高孔隙度的颗粒材料，它巨大的表面积比使得大量的羟基和醛基被暴露出来，因此，它的亲水性和吸水能力得到了大幅度增强。此外，微孔淀粉具有良好的生物相容性，可以被酶在体内降解成低聚糖麦芽糖和葡萄糖，最后被人体组织吸收。基于这些特性，微孔淀粉被研究作为载体来搭载吸附剂，催化剂和其他分子，应用于包括血管阻塞和药物输送等生物领域。目前，微孔淀粉也被应用于止血领域，例如一种被广泛使用的止血淀粉，对止血是安全有效的，但对于大量的出血是没有效果的。我们的目的是设计利用α淀粉酶和葡萄糖淀粉酶酶解玉米淀粉得到微孔淀粉，采用三偏磷酸钠酯化微孔淀粉并自组装凝血酶，通过这些成分的协同止血作用，达到快速有效且安全的止血效果。这种止血淀粉能够快速的吸收血液，使得血小板大量地聚集在伤口表面，并通过表面负电位及凝血酶的作用活化血小板达到快速止血。此外，该止血材料基材为淀粉，因此能被生物体快速降解并吸收，可用于体内止血。

发明内容

本发明公开了一种自组装凝血酶的酯化微孔止血淀粉的制备方法及其应用，该止血淀粉具有较好的止血效果，优良的生物相容性，极好的生物降解性，可以实现伤口的快速止血及止血淀粉在生物体内的快速降解。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

本发明提供一种自组装凝血酶的酯化微孔止血淀粉的制备方法，将微孔淀粉与三偏磷酸钠在碱性条件下加热反应，得到表面具有淀粉磷酯的酯化微孔淀粉，将酯化微孔淀粉与凝血酶水溶液混合后低温干燥，得到自组装凝血酶的酯化微孔止血淀粉。

本发明的有益效果是：本发明涉及的止血淀粉具有较大的表面积，较高的表面负电荷性，能够通过氢键稳定地结合大量凝血酶。第二，本发明涉及的止血淀粉能快速大量地吸入血液，聚集并活化血小板，达到快速止血的效果。第三，本发明涉及的止血淀粉没有生物毒性，并能够被组织细胞快速降解吸收。

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进：

进一步，所述微孔淀粉为酶解微孔淀粉、酸解微孔淀粉或者复合法微孔淀粉中的一种；所述微孔淀粉的淀粉来源为玉米淀粉、木薯淀粉或者小麦淀粉中的一种。

进一步，所述的凝血酶为牛凝血酶或者猪凝血酶中的一种。

进一步，所述自组装凝血酶的酯化微孔止血淀粉的制备方法，包括如下步骤：

1)将淀粉添和淀粉酶加到醋酸钠缓冲溶液中，加热搅拌之后抽滤得到淀粉滤渣，将滤渣烘干，研磨成粉，得到微孔淀粉；