[发明专利]多维复合酶菌剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种多维复合酶菌剂的制备方法，其特征在于，包括步骤：

S1：将细菌混合发酵液、霉菌混合物和酵母菌混合物混合，得到菌种混合物；

S2：将所述菌种混合物接种至固体发酵培养基中，得到发酵混合物；

S3：调节所述发酵混合物的水分为45％～55％，然后堆成锥形堆进行发酵，得到一次发酵产物；

S4：将所述一次发酵产物进行厌氧发酵，得到二次发酵产物；

S5：将所述二次发酵产物烘干后粉碎，得到所述多维复合酶菌剂。

2.根据权利要求1所述的多维复合酶菌剂的制备方法，其特征在于：

S1中，所述细菌混合发酵液、所述霉菌混合物和所述酵母菌混合物的质量比为1:1:3；

S2中，所述菌种混合物和所述固体发酵培养基的质量比(2～5):100；所述固体发酵培养基的原料组分包括麸皮、豆粕和玉米粉；所述麸皮、所述豆粕和所述玉米粉的质量比为3:1:1。

3.根据权利要求1所述的多维复合酶菌剂的制备方法，其特征在于：

S3中，所述锥形堆的中心温度为50～55℃，所述锥形堆发酵的时间为5～7天。

4.根据权利要求1所述的多维复合酶菌剂的制备方法，其特征在于：

S4中，所述厌氧发酵具体包括：将所述一次发酵产物转移至密闭装置中，装满密封后进行厌氧发酵；所述厌氧发酵的时间为6～8天，所述厌氧发酵的环境温度为22～25℃。

5.根据权利要求1所述的多维复合酶菌剂的制备方法，其特征在于：

S5中，所述烘干的温度为45～60℃。

6.根据权利要求1所述的多维复合酶菌剂的制备方法，其特征在于，

S1中，所述细菌混合发酵液的菌种包括枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌；

所述细菌混合发酵液的制备方法包括步骤；

将枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌分别在37℃进行斜面培养活化2～4h，然后分别采用营养肉汤培养基进行一次扩大培养；

将所述一次扩大培养的枯草芽孢杆菌、所述一次扩大培养的解淀粉芽孢杆菌、所述一次扩大培养的胶冻样芽孢杆菌和所述一次扩大培养的地衣芽孢杆菌分别按照3％～5％的接种量接种至发酵罐中，进行二次扩大培养，分别得到枯草芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液、胶冻样芽孢杆菌发酵液和地衣芽孢杆菌发酵液；

将所述枯草芽孢杆菌发酵液、所述解淀粉芽孢杆菌发酵液、所述胶冻样芽孢杆菌发酵液和所述地衣芽孢杆菌发酵液以3:2:1:3的体积比混合均匀，得到所述细菌混合发酵液；

其中，所述扩大培养的过程中：温度为37℃，摇床的转速为200r/min，培养时间为12h；所述二次扩大培养的过程中：通风比为1:1，培养温度为37℃，摇床的转速为200～220r/min，培养时间为18～21h，装液量为70％；所述二次扩大培养采用的培养基的组分按质量分数计，包括：葡萄糖0.6～0.8％、玉米浆粉2～3％、磷酸氢二钾0.1～0.3％、硫酸铵0.15～0.25％、氯化钠0.3～0.5％、泡敌0.1～0.2％、酵母膏0.25～0.3％，余量为水；pH值为6.5～7.5。

7.根据权利要求1所述的多维复合酶菌剂的制备方法，其特征在于：

S1中，所述霉菌混合物的菌种包括哈茨木霉和米曲霉；

所述霉菌混合物的制备方法包括步骤；

将哈茨木霉和米曲霉分别在28℃进行斜面培养活化36～48h，然后分别接种至固体培养基中进行固体培养，分别得到哈茨木霉发酵物和米曲霉发酵物；

将所述哈茨木霉发酵物和所述米曲霉发酵物以1:3的质量比混合，得到所述霉菌混合物；

其中，所述固体培养的温度为28℃，所述固体培养的时间为5～7天；所述固体培养基的原料组分包括物料和水，所述物料的组分按重量份计，包括：麸皮750份、豆粉250份、碳酸钙15～17份、硫酸镁0.5～1份、氢氧化钠0.1～1份、葡萄糖100～150份、牛肉膏15～20份和蛋白胨40～45份；所述物料和所述水的质量比为1:0.7。