[发明专利]一种N末端脑钠肽前体检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种N末端脑钠肽前体检测试剂盒及其检测方法；试剂盒，包括：试剂一：磷酸盐缓冲液，防腐剂，吐温20，聚乙二醇6000；试剂二：磷酸盐缓冲液，磷酸氢二钠，2‑5g/L磷酸二氢钠，氯化钠，防腐剂，羊抗人N末端‑前B型钠尿肽抗体的致敏乳胶颗粒；校准品：磷酸盐缓冲液，牛血清白蛋白，氯化钠，防腐剂，N末端‑前B型钠尿肽抗原；方法应用胶乳免疫比浊法提高试验敏感性，找到适合检测N末端脑钠肽前体的致敏乳胶颗粒，提高检测灵敏度；通过不同全自动生化分析仪配合不同试剂样本比，能同时定量检测大批量样本；采用试剂盒内含校准品，达到定量检测的目的。

技术领域

本发明涉及体外诊断领域，特别是一种N末端脑钠肽前体检测试剂盒及其检测方法。

背景技术

体外诊断试剂是指：可单独使用或与仪器、器具、设备或系统组合使用,在疾病的预防、诊断、治疗监测、预后观察、健康状态评价以及遗传性疾病的预测过程中,用于对人体样本(各种体液、细胞、组织样本等)进行体外检测的试剂、试剂盒、校准品(物)、质控品(物)等。

根据产品风险程度的高低，体外诊断试剂依次分为第三类、第二类、第一类产品。第三类产品：与致病性病原体抗原、抗体以及核酸等检测相关的试剂；与血型、组织配型相关的试剂；与人类基因检测相关的试剂；与遗传性疾病相关的试剂；与麻醉药品、精神药品、医疗用毒性药品检测相关的试剂；与治疗药物作用靶点检测相关的试剂；与肿瘤标志物检测相关的试剂；与变态反应(过敏原)相关的试剂。第二类产品：除已明确为第三类、第一类的产品，其他为第二类产品，主要包括：用于蛋白质检测的试剂；用于糖类检测的试剂；用于激素检测的试剂；用于酶类检测的试剂；用于酯类检测的试剂；用于维生素检测的试剂；用于无机离子检测的试剂；用于药物及药物代谢物检测的试剂；用于自身抗体检测的试剂；用于微生物鉴别或药敏试验的试剂；用于其他生理、生化或免疫功能指标检测的试剂。第一类产品：微生物培养基(不用于微生物鉴别和药敏试验)；样本处理用产品，如溶血剂、稀释液、染色液等。

NT-proBNP是BNP激素原(proBNP)分裂后无活性的N端片段，主要在心肌细胞受到容量负荷和压力负荷增高时由左心室分泌。NT-proBNP可用于评价心脏收缩功能不全以及舒张功能不全和心室壁节段运动协调性，有较高的敏感性和阴性预测价值；应用于早期发现心力衰竭(HF)病人，并进行危险分层，监测心衰药物的疗效评估，判断心衰病人的预后，区分心衰及其他原因引起的呼吸困难；可作为急性冠状动脉综合征(ACS)的风险评估指标。

NT-proBNP是一种在实验室中能方便处理的分子，在分析前与分析时拥有优势，比如在不同温度下都相当稳定，血样本要求不严。目前有关NT-proBNP检测方法有胶体金法、上转发光法、免疫荧光法等。

胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。该法检测较简便，缺点在于只能定性判断，只能单个样本检测。

上转发光法是以上转发光材料(up-converting phosphor，UCP)颗粒作为示踪物的一种新型的检测技术。它采用了免疫层析原理进行免疫标志物的检测免疫反应后,通过传感器定量拭纸条检测带与质控带上的UCP标记物，以检测带和指控带的定量比值来实现待检物的定量分析。依据其工作原理分为动态扫描与静态检测两种类型。缺点在于目前缺少与之配套的全自动检测系统，应用仅限于POCT领域，不能实现批量样本检测的需求。

免疫荧光法以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术。该法非特异性染色问题尚未完全解决，结果判定的客观性不足，技术程序也还比较复杂。

上面三种方法的操作复杂，耗时长，仪器设备要求高，检测的样本数量有限，现除了在某些专门的实验室进行测定外，在临床上很难实现大规模标本的自动化检测。