[发明专利]检测食管鳞癌外周血标记物microRNA-602及在药物和试剂盒中的应用

说明书

本发明属于分子生物学技术领域，具体公开了一种检测食管鳞癌转移分子标记物microRNA‑602及在药物和诊断试剂盒中的应用。本发明公开了microRNA‑602在制备具有抑制肿瘤药物中的应用和microRNA‑602在制备具有抑制食管鳞癌转移药物中的应用及分子标记物microRNA‑602在制备预测食管癌发生转移、预后及靶向治疗的诊断试剂盒中的应用。本发明利用分子生物学技术，能够有效地进行分子水平检测来判断食管鳞癌患者发生转移、预后及靶向治疗的标志，进而为个体化治疗这些疾病提供便利。同时对后续临床研究的开展具有重要的指导意义。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体地说，涉及一种检测食管鳞癌外周血标记物microRNA-602及在药物和试剂盒中的应用。

背景技术

食管癌是危害我国民众健康最为严重的恶性肿瘤之一，依据2013年世界卫生组织最新统计结果：食管癌发病率在我国恶性肿瘤中居第5位，死亡率居第4位。中国每年死于食管癌的人数为19,7472例，超过全世界食管癌总死亡人数的一半。同时，由于东西方人种不同以及食管癌发病病因等方面的差异，我国食管癌的特点与欧美等低发地区(食管胸下段、腺癌多发)明显不同，以胸中段、鳞癌为多，其中食管鳞癌(Esophageal squamous cellcarcinoma,ESCC)的比例高达90％以上。但我国食管癌发生、发展的分子机制尚不清楚，故尚不能针对病因治疗。因此，积极探索食管癌发生、发展的分子机制，对食管鳞癌的预防与治疗将发挥着重要的作用。

利用分子生物学技术，能够有效地进行分子水平检测来判断恶性肿瘤患者发生转移、预后及靶向治疗的标志。进而为个体化治疗这些疾病提供便利。

MicroRNA是长约19-22个核苷酸的小片段单链非编码RNA。它通过有缺陷的碱基配对绑定其靶基因的3’非翻译区的互补序列来控制基因表达，从而使靶基因在转录或者翻译水平表达下调。近来microRNA成为从生长发育到癌症等很多病理生理过程的重要和革命性的保守调节因素。在不同的恶性肿瘤中，同一microRNA的作用可能不同。一个microRNA可以有很多属于不同通路的靶基因，而一个基因可以被几个microRNA调控。科学家发展技术来识别与肿瘤分期和患者预后相关的特异的基因表达标记，以改善预后和治疗。人们使用全面转录研究来识别以基因表达为基础的预后标识，但是，目前为止无一能应用于临床。与经典的mRNA表达谱相比，microRNA肿瘤表达谱似乎能够更准确地确定肿瘤亚型的分类。越来越多的证据支持实体肿瘤有特异的microRNA标记。

与此同时，人们发现越来越多的microRNA的靶基因在食管鳞癌发生中起重要作用，例如miR-17、miR-20a、miR-92b等。目前，科学家对microRNA的靶基因的识别仍然有限。在分子框架中，成熟microRNA带电后成为microRNA诱导的沉默复合体(miRISC)。该复合体含有Argonaute家族(一类庞大的蛋白质家族)，与通常位于靶基因3’端非翻译区的互补位点反应。目前的模型认为microRNA和其靶基因的反应起源于位于microRNA的5’端的一段被称为“种子序列”的6至8个核苷酸短片段。MicroRNA诱导的沉默复合体能够将靶基因再配置成特别间隔，在其中处理翻译阻滞和mRNA衰变。许多研究证实了microRNA诱导的mRNA失稳。联合计算预测，mRNA表达谱的测量代表了识别功能microRNA-靶关系的有效方法。在食管鳞癌中，许多不同的microRNA调节异常，可能有致癌或抑癌作用，并预测预后。识别能够预测食管鳞癌患者预后的microRNA是一项重要发现，这表明microRNA可能在肿瘤进展中起重要作用。具有相似临床病理特点或者相同分期的食管鳞癌患者的转移发生和预后可能明显不同。分子标记物可以帮助医生鉴别高危患者，以便给予患者个体化治疗，从而改善生存。