[发明专利]一种预防和治疗人乳头瘤病毒感染的生物活性蛋白的制备方法

说明书

本发明公开了一种预防和治疗人乳头瘤病毒感染的生物活性蛋白的制备方法。包括以下步骤：将3‑羟基‑邻苯二甲酸酐HP溶于二甲基亚飒DMSO中，得到饱和的HP溶液；将乳铁蛋白溶于pH8.5，0.1M磷酸钠溶液中，得到蛋白终浓度为20 mg/mL的蛋白溶液；再将上述HP溶液分为五等份，每12min加入蛋白溶液中，震荡混匀，酸酐在反应体系中的终浓度为60mM，在温度为25℃的条件下，放置l小时，pH7.4 PBS超滤置换，再用0.45uM微孔滤膜抽滤除菌，4℃保存，加甘露醇冻干成粉，即得成品。本发明药物具有阻断HPV病毒入侵细胞、阻止病毒扩大感染、安全、稳定、成本低等优点。

技术领域

本发明涉及一种预防和治疗人乳头瘤病毒感染的生物活性蛋白的制备方法。

背景技术

乳多空病毒科(papovaviridae)的英文名源自乳头瘤病毒(papilloma virus)、多瘤病毒(polyoma virus)和猿猴空泡形病毒(similar vacuolating virus)三种，该病毒科包括乳头瘤病毒属(papillomavirus)和多瘤病毒属(polyomavirus)两个属，均为致瘤DNA病毒。乳头瘤病毒包括人乳头状瘤病毒及动物乳头状瘤病毒，已从多种动物及人类细胞中分离出来，具有种特异性的乳头瘤病毒已见于多种动物。由于乳头瘤病毒宿主范围很窄，命名常以宿主名称命名，如人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)；牛乳头瘤病毒(bovine papilloma virus，BPV)；犬口腔乳头瘤病毒(canine oral papillomatosisvirus，COPV)；多乳小鼠乳头瘤病毒(mastomys natalensis papilloma virus，MNPV)等。HPV在人类广泛传播，能引起人类皮肤和黏膜的多种良性乳头状瘤，在宫颈细胞学异常的患者中，不仅检出了高危型HPVl6，低危型HPV66也很常见，提示有必要进一步研究这些以往被认为是低危型的HPV是否可引起宫颈病变，它们的感染是引发组织恶性肿瘤尤其是宫颈癌的主要原因。

宫颈癌也称子宫颈癌，指发生在子宫阴道部及宫颈管的恶性肿瘤，是女性常见恶性肿瘤之一，发病率位于女性肿瘤的第二位。全世界每年大约有20万妇女死于这种疾病。发病原因目前尚不清楚，早婚、早育、多产及性生活紊乱的妇女有较高的患病率。宫颈癌早期症状多为接触性出务，阴道排液，液体为白色或血性或腥臭味。后期根据癌灶累及范围出现不同的继发性症状。癌肿压迫或累及输尿管时，可引起输尿管梗阻、肾盂积水及尿毒症；晚期可有贫血、恶病质等全身衰竭症状。目前，该疾病在全球每年新发病例约50万例。我国每年新发病例约13.5万，约占世界宫颈癌新发病例总数的1/4，死亡人数约为5万人。特别是近十年来，其发病率飙升，增长幅度高达68.8%，成为死亡率增长最快的疾病，居妇女癌症的首位。随着我国性开放程度的加深，宫颈癌的发病率及发病年龄可能将有明显上升及提前的趋势。因此，目前我国急需能够有效预防和控制 HPV 病毒感染的药物及生物制剂。