[发明专利]基于基因检测聚合选育耐盐色叶紫薇的方法有效
申请号: | 201810471345.3 | 申请日: | 2018-05-17 |
公开(公告)号: | CN108651273B | 公开(公告)日: | 2021-06-15 |
发明(设计)人: | 张健;姚登兵;余春梅;汪保华;邓自发;陈艳红;赵祥强 | 申请(专利权)人: | 南通大学 |
主分类号: | A01H1/02 | 分类号: | A01H1/02;A01H1/04;A01G7/06 |
代理公司: | 上海唯源专利代理有限公司 31229 | 代理人: | 曾耀先 |
地址: | 226000*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 基因 检测 聚合 选育 耐盐色叶 紫薇 方法 | ||
1.一种基于基因检测聚合选育耐盐色叶紫薇的方法,其特征在于,包括以下步骤:
选取母本敏盐色叶紫薇与父本耐盐普通紫薇品种杂交获得F1代植株群;
采用不同浓度的NaCl溶液盐胁迫所述F1代植株群,并对盐胁迫后的所述F1代植株群的植株根系进行转录组测序以确定紫薇的耐盐检测基因;
对所述敏盐色叶紫薇的同一时期的不同颜色的叶片进行转录组测序以确定紫薇的色叶检测基因;
根据确定的所述耐盐检测基因和所述色叶检测基因检测待测的F1代植株以选育聚合耐盐色叶基因的紫薇新品种;
所述采用不同浓度的NaCl溶液盐胁迫所述F1代植株群的步骤包括:
配置浓度分别为0mMNaCl、50mMNaCl、100mMNaCl、150mMNaCl溶液;
截取所述F1代植株群的多条半木质化枝条并分别放置于浓度不同的所述溶液中生根进行耐盐性等级鉴定,耐盐性等级包括不耐盐、耐盐、强耐盐和极耐盐;
截取被鉴定为不耐盐和极耐盐的F1代植株的多条半木质化枝条进行扦插生根后分别分成胁迫组和对照组;
将所述胁迫组放入150mM NaCl溶液进行盐胁迫,同时,将对照组放入清水中;
所述对盐胁迫后的所述F1代植株群的植株根系进行转录组测序以确定紫薇的耐盐检测基因的步骤包括:
将所述对照组和经过盐胁迫的所述胁迫组的植株根系进行转录组测序,筛选出耐盐差异表达基因;
利用生物信息学软件将筛选出的所述耐盐差异表达基因与公共数据库中进行比对注释筛选出待确定耐盐候选基因;
将所述待确定耐盐候选基因通过RT-PCR验证并确定出耐盐候选基因;
将所述耐盐候选基因通过烟草瞬时表达验证并确定为所述耐盐检测基因;
所述根据确定的所述耐盐检测基因和所述色叶检测基因检测待测的F1代植株以选育聚合耐盐色叶基因的紫薇新品种的步骤包括:
截取待测的F1代植株的半木质化枝条进行扦插,使得所述待测的F1代植株的半木质化枝条生根生叶;
对生根的所述待测的F1代植株的半木质化枝条的植株根系采用盐胁迫;
利用所述耐盐检测基因和所述色叶检测基因检测经由盐胁迫的所述半木质化枝条的植株根系和叶片中的基因表达量,确定同时符合所述耐盐检测基因和所述色叶检测基因的基因表达数量的所述待测的F1代植株为所述紫薇新品种。
2.根据权利要求1所述的基于基因检测聚合选育耐盐色叶紫薇的方法,其特征在于,所述选取敏盐色叶紫薇与耐盐普通紫薇品种杂交获得F1代植株群的步骤包括:
选取所述敏盐色叶紫薇与所述耐盐普通紫薇品种杂交获得多个杂交种;
将多个所述杂交种播种,使得多个所述杂交种生根成苗形成所述F1代植株群。
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