[发明专利]NKIRAS2基因调控区序列、调控序列及其在鼻咽癌中的应用有效

专利信息
申请号: 201810472365.2 申请日: 2018-05-17
公开(公告)号: CN109321655B 公开(公告)日: 2022-07-05
发明(设计)人: 潘建基;许元基;叶韵斌;宗井凤;林少俊 申请(专利权)人: 福建省肿瘤医院(福建省肿瘤研究所;福建省癌症防治中心)
主分类号: C12Q1/6886 分类号: C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/113;C12N15/867;C12N5/10
代理公司: 福州科扬专利事务所(普通合伙) 35001 代理人: 严欢
地址: 350014 福*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: nkiras2 基因 调控 序列 及其 鼻咽癌 中的 应用
【说明书】:

发明提供了NKIRAS2基因调控区序列,并充分揭示了该调控区序列可被如miR‑BART13的调控序列调节,从而作用于NF‑κB信号通路,最终影响鼻咽癌的增殖和侵袭转移;在此过程中构建了单独包含调控区序列或调控序列的重组载体,以及包含重组载体的鼻咽癌相关细胞。这些可以做为鼻咽癌诊断方法检测靶标和防治药物开发靶点,此外也可以为鼻咽癌增殖和侵袭转移机制研究以及临床诊治方法和药物开发提供理论基础和应用依据。

技术领域

本发明属于分子生物学领域,具体涉及NKIRAS2基因调控区序列、调控序列及其在鼻咽癌中的应用。

背景技术

鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma, NPC)是东南亚和我国南方地区高发的癌症,放疗为其治疗首选。目前早期NPC的5年生存率可达95%以上,然而由于NPC早期症状不明显,75%以上的初诊患者被确诊时即为晚期,而局部晚期NPC的5年总生存率只有78.4-80%,且有20-30%患者发生局部治疗失败或远处转移。因此研究NPC的发生发展机制,探索其中的关键基因,揭示基因上的重要靶点,从而开发相应的特异的检测方法和治疗药物或手段,这对于NPC的筛查和诊治具有重要意义。研究表明,miRNA(microRNA,简写为miR)在包括NPC的癌症中表达会出现失调,已被初步证明和癌症的生物行为密切相关,因此是癌症机制研究以及诊治方法和药物开发的重要切入点。

NPC和EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)感染显著相关,EBV在NPC细胞中仅表达少数病毒蛋白,却大量表达miRNA。申请人团队前期研究发现EBV产生的miR-BART13即EBV-miR-BART13(BamHI-A Rightward Transcript 13, BART13)在NPC细胞C666-1中高表达,并可分泌到细胞外;miR-BART13在NPC患者的血浆中特异高表达,其表达水平与其N分期、临床分期显著正相关,且在放疗完成时降至接近0等医学生物学现象和规律。然而miR-BART13在NPC发生发展中的具体分子机制尚未被揭示。经过深入研究,本发明首次阐明了miR-BART13通过靶向抑制NKIRAS2基因来活化NF-κB信号通路,从而影响NPC的增殖和侵袭转移。本发明揭示的NKIRAS2基因和miR-BART13的具体作用靶点,可以做为NPC诊断方法检测靶标和防治药物开发靶点,此外也可以为NPC增殖和侵袭转移机制研究以及临床诊治方法和药物开发提供理论基础和应用依据。

发明内容

本发明首次提供了NKIRAS2基因的一种调控区序列及其调控序列,尤其是EBV的miR-BART13这一调控序列,构建含有调控区序列或调控序列的载体和NPC细胞株;在阐明所述调控区序列和调控序列对NPC增殖和侵袭转移的影响和具体通路的基础上,提供了在NPC中的相关应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下:

本发明的目的之(1)在于提供NKIRAS2基因调控区序列、包含特定调控区序列的重组病毒载体、包含所述重组病毒载体的细胞以及这三者在NPC中的应用,具体如下:

NKIRAS2基因调控区序列如SEQ ID NO:1-4中的任一序列所示,均为7核苷酸序列。其中,SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:3所示的调控区序列的转录序列分别是如SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:2所示的序列。本发明中所述的序列是指核苷酸序列及其衍生物;基因调控区序列主要是指特定区域基因序列本身或该区域转录序列,这些序列需要满足可以受调控分子作用从而调节基因整体的表达水平,如果调控分子为核酸及其衍生物的则称之为调控序列。NKIRAS2基因调控区序列除了指明的SEQ ID NO:1-4中的任一序列这一调控区功能序列外,还可以有其它核苷酸序列及其衍生物,但不能够影响调控区序列和调控序列的相互结合和调节功能的发挥。

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