[发明专利]细胞周期蛋白依赖性激酶底物

说明书

本发明提供对于细胞周期蛋白依赖性激酶的反应性高的，并且/或对于选自细胞周期蛋白依赖性激酶4及细胞周期蛋白依赖性激酶6的至少1种的特异性更高的，分子量更小的细胞周期蛋白依赖性激酶底物。本发明的细胞周期蛋白依赖性激酶底物含式(1)：R¹‑P【式(1)】(式中：R¹表示丝氨酸残基或苏氨酸残基。P表示脯氨酸残基。‑表示单键。左侧表示N末端侧)所表示的氨基酸序列，并且由满足下述(a1)和/或(b1)的多肽构成：(a1)上述式(1)中的从脯氨酸残基起向N末端侧数第2个氨基酸残基是芳香族氨基酸残基，和/或(b1)上述式(1)中的从脯氨酸残基起C末端侧的至少2个氨基酸残基是酸性氨基酸残基。

【技术领域】

本发明涉及细胞周期蛋白依赖性激酶底物。

【背景技术】

各种生理反应、癌等的疾病等与由细胞的成长、DNA的复制、染色体的分配、细胞的分裂等构成的多个连续反应(细胞周期)的调节机制密切相关。此细胞周期由作为主要磷酸化酶的细胞周期蛋白依赖性激酶的活性调节。

细胞周期蛋白依赖性激酶的活性通常由细胞周期蛋白的结合成为活性型，由细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子的结合成为无活性型。另外，报告存在多种细胞周期蛋白依赖性激酶，代表性地，存在细胞周期蛋白依赖性激酶1、2、4、6等。这些，通常各自控制在细胞周期中的不同的反应。

因此，在各种生理反应、疾病等的解析中，评价细胞周期蛋白依赖性激酶的活性的系统的构建是重要的。

【现有技术文献】

【专利文献】

【专利文献1】专利第4828752号

【发明概述】

【发明要解决的课题】

例如，细胞周期蛋白依赖性激酶4及6被当作乳腺癌的分子目标。因此，本发明人着眼于评价这些细胞周期蛋白依赖性激酶的活性。

在专利文献1中报告了评价细胞周期蛋白依赖性激酶4或6的活性的方法，其作为底物使用RB(网膜母细胞瘤)蛋白质，针对每各激酶，通过使用对于不同的磷酸化部位的特异性抗体而检测磷酸化。但是，由于RB蛋白质的分子量比较大，从生产成本或稳定性等的观点来看，其试剂化被认为伴随困难。

一方面，关于分子量比较小的底物肽，一般知道细胞周期蛋白依赖性激酶的磷酸化目标部位的最适共有序列是(S/T)PX(K/R)(X是任意的氨基酸残基)。但是，含此共有序列的市售的细胞周期蛋白依赖性激酶4/6底物肽的反应性及特异性低。

从而，本发明旨在提供对于细胞周期蛋白依赖性激酶的反应性高的、并且/或对于选自细胞周期蛋白依赖性激酶4及细胞周期蛋白依赖性激酶6的至少1种的特异性更高，细胞周期蛋白依赖性激酶底物、优选为分子量更小的细胞周期蛋白依赖性激酶底物。

【用于解决课题的手段】

本发明人鉴于上述课题而进行锐意研究的结果发现，只要是满足细胞周期蛋白依赖性激酶的磷酸化位点(SP或TP)之中的从脯氨酸残基起向N末端侧数第2个氨基酸残基是芳香族氨基酸残基，和/或从该脯氨酸残基起C末端侧的至少2个氨基酸残基是酸性氨基酸残基的多肽，就可解决上述课题。本发明人基于此见解而进行进一步研究的结果，完成本发明。

即，本发明作为一实施方式包含下述的实施方式：

项A.细胞周期蛋白依赖性激酶底物，其含式(1)所表示的氨基酸序列：R¹-P【式(1)】(式中：R¹表示丝氨酸残基或苏氨酸残基。P表示脯氨酸残基。-表示单键。左侧表示N末端侧。)，并且由满足下述(a1)和/或(b1)的多肽构成：(a1)上述式(1)中的从脯氨酸残基起向N末端侧数第2个氨基酸残基是芳香族氨基酸残基，和/或(b1)上述式(1)中的从脯氨酸残基起C末端侧的至少2个氨基酸残基是酸性氨基酸残基。