[发明专利]当归饮片指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

说明书

本发明公开了一种当归饮片指纹图谱的建立方法及其指纹图谱，涉及中药材的指纹图谱技术领域，该方法包括供试品溶液的制备和高效液相色谱检测条件，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得当归饮片的指纹图谱；将色谱数据导入SPSS19.0版软件进行聚类分析，得标准化自制饮片与市售饮片的聚类结果。本发明的积极效果是：本发明建立了当归饮片HPLC指纹图谱的共有模式，标定了29个共有峰，能有效的表征其质量，克服了原质量控制方法的单一性，具有较高的应用价值。

技术领域

本发明涉及中药材的指纹图谱技术领域，尤其是当归饮片指纹图谱的建立方法与其指纹图谱。

背景技术

当归Angelica sinensis(Oliv.)Diels是伞形科植物多年生当归的干燥根，又名西归、秦归、云归，始载于《神农本草经》，为低温长日照植物，主产地为甘肃岷县。其生品性温，味甘、辛，归肝、心、脾经，具补血活血，调经止痛，润肠通便的功效，主治月经不调，经闭痛经，血虚萎黄，眩晕心悸等症，为临床常用的一味中药，明代李时珍《本草纲目》中有“当归调血，为女人要药”的记载。文献报道，当归主要含有苯肽类、有机酸及其酯类、糖类等成分，具有造血、抗炎、镇痛、抗血小板聚等多方面药理作用。

目前，我国中药制剂的质量参差不齐，即使是同一厂家生产的不同批次的制剂质量也无法做到稳定均一。而饮片作为制剂的主要原料，炮制方法不统一，在很大程度上使得饮片的物质基础发生变化，最终影响制剂质量。当归饮片作为新生化颗粒的君药，主要用于补血活血，化瘀生新，行滞止痛。目前市场上当归饮片掺假、提取现象层出不穷，仅凭肉眼难以鉴别真伪优劣，提高当归饮片质量，保障制剂质量已迫在眉睫。

现行当归质量标准含量测定项下仅对水溶性成分阿魏酸进行限定，较为单薄。前人虽已有报道岷县当归药材HPLC指纹图谱，但样本量有限，且用当归药材与市售饮片进行质量比对，未考虑投料生产的是饮片而非药材，可比性不大。故本研究对50批岷县不同产区的当归饮片(自制)及15批市售饮片的质量进行比对，建立HPLC指纹图谱，结合主成分分析以更好地评价新生化颗粒原料饮片当归质量，确保当归饮片质量一致性，从而确保新生化颗粒品质一致性，保障临床疗效，促进新生化颗粒标准体系提质增效，推动新生化颗粒标准化进程。

发明内容

本发明要解决的问题是提供当归饮片指纹图谱的建立方法及其指纹图谱，利用该图谱可以较为全面地评价当归饮片的质量，从而更好地保证当归饮片的质量稳定性、一致性、可控性，从而保证制剂新生化颗粒的质量的稳定均一。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

(1)供试品溶液的制备：取当归饮片粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，精密加入5％甲酸甲醇25mL，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30min，取出，放冷，补足失重，摇匀，取续滤液，作为供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：称取适量阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、藁本内酯、正丁基苯酞、丁烯基苯酞对照品，精密称定，加乙腈制成质量浓度分别为0.06mg/mL、0.19mg/mL、0.12mg/mL、0.52mg/mL、0.87mg/mL、0.28mg/mL、0.61mg/mL的混合对照品溶液，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液。

(3)高效液相色谱检测：吸取上述步骤(1)所得供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱检测，记录65min内的指纹图谱：

其中，前述方法中，所述高效液相色谱测定的色谱条件为：