[发明专利]一种植物酶的提取方法

说明书

本发明提供一种植物酶的提取方法，该植物酶的提取方法包括：将冷冻后的植物样品进行破碎处理，以使所述植物样品成粉末状植物样品；其中，破碎速度为2000rpm～9000rpm，破碎时间为10～50s。本发明提出的植物酶的提取方法，通过优化破碎处理过程中的转速和破碎时间，避免了研磨过程中植物酶活性降低，并采用漏斗转移装置对粉末状植物样品进行转移，极大地提高了样品转移率。

技术领域

本发明涉及植物提取技术领域，更具体地，涉及一种植物酶的提取方法。

背景技术

酶是指具有生物催化功能的高分子物质。与其他非生物催化剂不同的是，酶具有高度的专一性，只催化特定的反应或产生特定的构型。在酶的催化反应体系中，反应物分子被称为底物，底物通过酶的催化转化为另一种分子。几乎所有的细胞活动进程都需要酶的参与，以提高效率。与其他非生物催化剂相似，酶借着提供另一条活化能(用Ea或ΔG表示)需求较低的途径来使反应进行，使更多反应粒子能拥有不少于活化能的动能，从而加快反应速率。大多数的酶可以将其催化的反应速率提高上百万倍。

植物中的酶影响细胞的分裂、伸长、分化到影响植物发芽、生根、开花、结实、性别的决定、休眠和脱落等生命过程，植物活性酶对其生长发育有重要的调节控制作用。植物生长需要进行光合作用、吸收养分以及抵御各种逆境对植物的伤害等活动都需要酶的参与。通过对植物中的活性酶的提取及活性测定，能明确植物生长的状况及抗逆性等特性，对作物提高光合作用进而提高作物产量，实施精准施肥以及筛选抗性强的作物品种提供理论依据。其次，植物酶在工业和人们的日常生活中的应用也非常广泛，例如在保健方面，可提取植物中的酶作为保健产品，内含丰富的SOD、POD等抗氧化酶成分，能提高体内抗氧化能力，增强免疫力。但对作物进行植物酶研究以及对植物活性酶进行利用都需要一种便捷、高效的酶的提取方法，确保研究数据的准备性和产品的有效性。

现有植物酶的提取方法一般使用研钵匀浆法和超声波法以及机械研磨法，研钵匀浆法费时费力；超声法对于有细胞壁的植物组织来说比较耗时，效果欠佳；机械研磨法存在过度研磨导致的发热破坏酶的的活力，若没有快速、高效的转移方法，损耗较大。

发明内容

本发明的第一目的是提供一种克服上述问题或者至少部分地解决上述问题的植物酶的提取方法。

该植物酶的提取方法包括将冷冻后的植物样品进行破碎处理，以使所述植物样品成粉末状植物样品；其中，破碎速度为2000rpm～9000rpm，破碎时间为10～50s。

在本发明一个优选实施方式中，为了进一步降低在研磨过程中植物酶的活性损失，所述破碎速度为7000rpm～8000rpm，破碎时间为30～40s。

在本发明一个优选实施方式中，为了进一步提高植物酶的活性，在进行破碎处理时，破碎8～12s后停止破碎3～5s，直至所述植物样品成粉末状植物样品。在停止破碎时优选将体系置于液氮中速冷。即，可以在进行破碎处理时，破碎8～12s后停止破碎3～5s，并在停止破碎时将反应体系置于液氮中速冷，如此反复操作，直至所述植物样品成粉末状植物样品。

在本发明一个优选实施方式中，在所述破碎处理中，使用液氮以确保所述冷冻后的植物样品为冷冻状态，以确保植物样品中所提取的酶的总活性的稳定。

在本发明一个优选实施方式中，所述植物样品为(1cm～3cm)*(1mm～3mm)，优选为1cm*2mm，在保证酶活性的同时能最大限度缩短粉碎样品的时间。

在本发明一个优选实施方式中，所述植物样品为植物叶片，优选为含有多糖和/或多酚的叶片，进一步优选为茶树叶片，更优选为夏季茶树叶片。上述植物样品优选为粉碎后易氧化的物质。进一步优选本发明的提取方法是提取茶树叶片中GS酶、GOGAT酶和/或Rubisco酶。

在本发明一个优选实施方式中，所述冷冻后的植物样品为经液氮冷冻1～4h后的植物样品，冷冻时间优选为3～4h。