[发明专利]一种高DHA含量的裂壶藻及其应用

说明书

本发明涉及一种高DHA含量的裂壶藻，所述裂壶藻于2017年11月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M2017689；还涉及所述裂壶藻的在制备DHA中的应用；还涉及所述裂壶藻的培养方法。本发明的裂壶藻W1生长快，可进行完全异养生长。在缺氮诱导的情况下，所述裂壶藻可大量积累DHA。因此，本发明的裂壶藻及培养方法可用于制备DHA或者具有高DHA含量的食品添加剂或饲料添加剂，具有良好的经济效益。

技术领域

本发明涉及微藻培养和不饱和脂肪酸生产领域，更特别地，涉及一种高DHA含量的裂壶藻及其应用。

背景技术

多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated Fatty Acid，PUFA)是指含有两个或两个以上双键且碳长度为18-22个碳原子的直链脂肪酸，主要包括亚油酸(LA)、γ-亚麻酸(GLA)、α-亚麻酸(ALA)、花生四烯酸(AA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)等。在PUFA中，距羧基端最远的双键在第3个碳原子上称为ω-3(n-3)系列，如在第6个碳原子上则称为ω-6(n-6)系列。

二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid，DHA)是目前发现的碳链最长、不饱和度最高的长链高度不饱和脂肪酸。DHA是机体生物膜的重要结构组分，在婴幼儿神经发育、视网膜形成、智力发展等方面具有重要作用，而且也是前列腺素、换前列腺素和白三烯素等具有强烈生理活性的自身调节物质的前体，对预防心血管疾病、抗血脂、降血压、抑制肿瘤形成等具有显著作用。由于具有上述多种重要生理功能，DHA已经成为价值高、市场广泛的脂肪酸产品。

微藻是一类单细胞或多细胞的低等植物。微藻中许多种类富含蛋白质、油脂、多糖等营养成分，还有的种类富含不饱和脂肪酸、类胡萝卜素、维生素等生理活性成分。但是，目前的微藻产业主要依靠自养生长进行开放池培养，DHA总体产量低、价格高，限制了DHA在营养和科研中的应用。

发明内容

发明人在中国湖北省武汉市水域内采样分离得到一株能在高盐度培养基中生存生长的微藻，该微藻以单细胞形式存在，呈球形，直径4-30μm，不运动，无鞭毛，显微镜下呈透明球状。根据细胞形态和生活习性以及18S rDNA测序显示，其属于真核生物域，囊泡藻界Chromalveolata，异鞭藻类(Heterokontophyta或Stramenopiles)，双环门(Bigyra)，Labyrinthulomycetes目，Thraustochytriaceae科，裂壶藻属(Schizochytrium)。

基于以上发现，本发明提供了一种高DHA含量的裂壶藻，所述裂壶藻于2017年11月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M2017689。

本发明还提供上述裂壶藻在制备DHA中的应用。

本发明还提供了一种培养上述裂壶藻的方法，包括以下步骤：

S1：在全培养基中培养所述裂壶藻，积累生物量；

S2：收集S1培养的裂壶藻藻细胞；

S3：将所述裂壶藻藻细胞转接至缺氮培养基中培养，得到所述裂壶藻培养物。通过分段式培养的方法可保证类壶藻在短期内先增殖得到大量的生物量，然后通过缺氮可诱导裂壶藻体内积累大量DHA。

在一个优选实施方案中，所述全培养基为含有20g/L葡萄糖、5g/L酵母浸粉、5g/L蛋白胨、1mL/L A5溶液和24g/L人工海盐的水溶液。

在一个优选实施方案中，所述全培养基的pH为6-8，所述全培养基的溶氧在2％以上。

在一个优选实施方案中，S1中培养温度为25℃。经我们的研究表明，该裂壶藻在25℃下生长最快。

在一个优选实施方案中，所述缺氮培养基的其他组分与所述全培养基相同，氮含量为所述全培养基的1/4-1/2。