[发明专利]一种龙脷叶的组培培养基及其快速繁殖方法有效
申请号: | 201810480465.X | 申请日: | 2018-05-18 |
公开(公告)号: | CN108476983B | 公开(公告)日: | 2020-03-24 |
发明(设计)人: | 王继华;蔡时可 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院作物研究所 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;A01H4/00 |
代理公司: | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人: | 曾嘉仪;徐朝荣 |
地址: | 510640 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 龙脷叶 培养基 及其 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种龙脷叶的组培培养基,其特征在于,包括不定芽诱导培养基、继代增殖培养基和无菌生根培养基;
不定芽诱导培养基:在改良MS培养基的基础上添加6-BA、AD以及IAA;其中,6-BA的浓度为0.05-0.5mg/L,AD的浓度为0.1-0.2mg/L,IAA的浓度为0.05-0.2mg/L;
继代增殖培养基:在改良MS培养基的基础上添加6-BA、AD以及IAA,其中,6-BA的浓度为0.5mg/L,AD的浓度为0.1mg/L,IAA的浓度为0.05mg/L;
无菌生根培养基:在改良MS培养基的基础上添加IBA和IAA,其中,IBA的浓度为0.2mg/L,IAA的浓度为0.5mg/L;
改良MS培养基:用Ca(NO3)2•4H2O代替MS培养基中的CaCl2•2H2O和NH4NO3,再添加核黄素,其余组分均无变化;其中,Ca(NO3)2•4H2O的浓度为168mg/L,核黄素的浓度为20mg/L。
2.如权利要求1所述的龙脷叶的组培培养基,其特征在于,不定芽诱导培养基中,6-BA的浓度为0.5mg/L,AD的浓度为0.2mg/L,IAA的浓度为0.2mg/L。
3.一种龙脷叶的组培快速繁殖方法,其特征在于,包括:
外植体选择步骤:选取生长健康的龙脷叶幼嫩的枝条作为外植体;
外植体消毒步骤:将外植体进行消毒处理,得到消毒外植体;
不定芽诱导步骤:将消毒外植体切割成0.3-0.5cm长的单芽茎段,然后接种于不定芽诱导培养基中,进行诱导培养15-30天,得到龙脷叶不定芽;
继代增殖步骤:将龙脷叶不定芽接种于继代增殖培养基中,进行继代培养20-25天,得到龙脷叶无菌苗;
无菌生根步骤:将龙脷叶无菌苗进行切繁,并保持每株均有一个不定芽,接种于无菌生根培养基中,进行生根培养15-20天,得到龙脷叶幼苗;
炼苗与移栽步骤:将龙脷叶幼苗进行炼苗与移栽;
其中,不定芽诱导培养基、继代增殖培养基和无菌生根培养基分别为权利要求1-2任意一项所述的不定芽诱导培养基、继代增殖培养基和无菌生根培养基。
4.如权利要求3所述的龙脷叶的组培快速繁殖方法,其特征在于,外植体消毒步骤的具体过程为:用中性洗涤剂洗涤枝条,以去除枝条表面的污垢,然后去除多余的叶片,用干净纸巾吸干表面水分,立即转入浓度为0.1-0.3%的升汞溶液中消毒8-12min,最后用无菌水洗涤3-5次,每次3-5min,得到消毒外植体。
5.如权利要求3所述的龙脷叶的组培快速繁殖方法,其特征在于,不定芽诱导步骤中,诱导培养条件如下:温度为26±2℃,湿度为58%,光照时间为14小时/天,光照强度为800-12001x。
6.如权利要求3所述的龙脷叶的组培快速繁殖方法,其特征在于,继代增殖步骤中,继代增殖培养条件如下:温度为26±3℃,湿度为50-65%,光照时间为14小时/天,光照强度为800-12001x。
7.如权利要求3所述的龙脷叶的组培快速繁殖方法,其特征在于,无菌生根步骤中,生根培养条件如下:培养温度为26±3℃,湿度为50-65%,光照时间为14小时/天,光照强度为800-12001x。
8.如权利要求3所述的龙脷叶的组培快速繁殖方法,其特征在于,炼苗与移栽步骤的具体过程如下:待龙脷叶幼苗生长至根长0.3cm、苗高5cm后,室内炼苗培养5天,然后洗净根部培养基移入到遮光率75-80%的遮阳网的塑料大棚内,保持湿润。
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