[发明专利]作为癌症生物标志物的肿瘤抑制基因REC8在审
申请号: | 201810481334.3 | 申请日: | 2018-05-18 |
公开(公告)号: | CN108949972A | 公开(公告)日: | 2018-12-07 |
发明(设计)人: | 于君;沈祖尧;梁巧仪 | 申请(专利权)人: | 香港中文大学 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12N15/11 |
代理公司: | 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 11204 | 代理人: | 王达佐;洪欣 |
地址: | 中国香*** | 国省代码: | 中国香港;81 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因 胃癌 肿瘤抑制基因 基因组序列 甲基化水平 甲基化状态 生物标志物 快速确定 试剂盒 预后 检测 灵敏 升高 癌症 诊断 | ||
1.确定REC8基因甲基化状态的方法,其包括以下步骤:
(1)用亚硫酸氢盐处理从取自对象的生物样品获得的基因组DNA;
(2)使用包含SEQ ID NO:11或12的核苷酸序列的引物进行扩增反应,以扩增来自步骤(1)的经处理的基因组DNA;
(3)分析来自步骤(2)的扩增反应产物,以确定REC8基因的甲基化状态。
2.如权利要求1所述的方法,其中
所述生物样品是组织样品,血液、血浆或血清样品,粪便样品或尿液样品;和/或
所述对象被怀疑患有癌症或处于发展成癌症的风险中;和/或
所述对象被怀疑患有选自胃癌、肝癌或结肠癌的癌症,或具有发展成选自胃癌、肝癌或结肠癌的癌症的风险。
3.如权利要求1所述的方法,其中
步骤(3)包括确定来自步骤(2)的扩增反应产物的核苷酸序列;和/或
步骤(3)包括使来自步骤(2)的扩增反应产物与甲基化探针或非甲基化探针杂交。
4.如权利要求3所述的方法,其中
所述甲基化探针包含SEQ ID NO:13的核苷酸序列,或所述甲基化探针由SEQ ID NO:13的核苷酸序列组成;和/或
所述非甲基化探针包含SEQ ID NO:14的核苷酸序列,或所述非甲基化探针由SEQ IDNO:14的核苷酸序列组成。
5.如权利要求1所述的方法,其中步骤(2)中的扩增反应是聚合酶链式反应(PCR)。
6.如权利要求5所述的方法,其中
所述PCR是定量PCR(qPCR);和/或
在所述PCR中使用包含SEQ ID NO:11和12的核苷酸序列的引物,或在所述PCR中使用由SEQ ID NO:11和12的核苷酸序列组成的引物。
7.用于检测REC8基因的甲基化状态的试剂盒,其包含:(1)包含SEQ ID NO:11的核苷酸序列的寡核苷酸引物;和(2)包含SEQ ID NO:12的核苷酸序列的寡核苷酸引物。
8.如权利要求7所述的试剂盒,其中在PCR中使用由SEQ ID NO:11和12的核苷酸序列组成的引物。
9.如权利要求7所述的试剂盒,其还包含:(3)甲基化探针或非甲基化探针。
10.如权利要求9所述的试剂盒,其中
所述甲基化探针包含SEQ ID NO:13的核苷酸序列,以及所述非甲基化探针包含SEQ IDNO:14的核苷酸序列;或
所述甲基化探针由SEQ ID NO:13的核苷酸序列组成,以及所述非甲基化探针由SEQ IDNO:14的核苷酸序列组成。
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