[发明专利]一种提高CIK细胞活性的培养方法在审
| 申请号： | 201810485928.1 | 申请日： | 2018-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN108642011A | 公开（公告）日： | 2018-10-12 |
| 发明（设计）人： | 王欢 | 申请（专利权）人： | 王欢 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214023 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 苦蘵 内酯 烯醇 莪术 颗粒酶B 激活剂 制备 肿瘤细胞 中颗粒 柱层析 激活 发现 | ||
【权利要求书】：
1.一种CIK细胞的培养方法，其特征在于：
取外周抗凝血100mL，加入淋巴细胞分离液，1500rpm离心15min，吸取单个核细胞层，用生理盐水洗涤3次，每次1500rpm离心10min；最后一次离心后重悬细胞，按细胞数5×106个/mL加含有500μg/L CD3mAB、1000U/mL IL-2和10％FBS的GT-T551培养基诱导培养成CIK细胞，每隔2～3d半量换液。
诱导培养7天后，用新的含有500μg/L CD3mAB、1000U/mL IL-2和10％FBS的GT-T551培养基调整细胞数为2×106/ml，并加入颗粒酶B激活剂至终浓度为4-6μM，刺激培养2d后，换成含有500μg/L CD3mAB、1000U/mL IL-2和10％FBS的GT-T551培养基继续培养，每隔2～3d半量换液。
所述颗粒酶B激活剂为魏察苦蘵素A。
2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于：外周抗凝血取自健康人或肿瘤患者。
3.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于：颗粒酶B激活剂终浓度为5μM。
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