[发明专利]一种小球藻生长因子（CGF）提取工艺

权利要求书

1.一种小球藻生长因子（CGF）提取工艺，其特征在于，包括如下步骤：

步骤（1）、温浴：将小球藻冻干粉放入至50-70℃的温水中进行浸泡，使得小球藻细胞壁扩张、软化；

步骤（2）、超声波处理：将步骤（1）所得到的小球藻溶液转移至超声波处理器中进行超声波处理，使得小球藻细胞壁得到初步破坏；

步骤（3）、酶处理：将步骤（2）所得到的小球藻超声波处理液中加入破壁酶进行处理；

步骤（4）、膜过滤：将步骤（3）所得到的小球藻酶处理液进行灭活处理，并通过梯度过滤膜组进行过滤；

步骤（5）、冷冻干燥：将步骤（4）所得到的小球藻膜过滤液进行冷冻干燥，得到含有小球藻生长因子（CGF）的粉末。

2.如权利要求1所述的小球藻生长因子（CGF）提取工艺，其特征在于，步骤（2）中，超声波处理的温度为50-60℃，处理时间为30-50min。

3.如权利要求1所述的小球藻生长因子（CGF）提取工艺，其特征在于，步骤（3）中，加入蒸馏水，使得小球藻冻干粉与溶剂的质量比为1：100-1：150，所加入的破壁酶与小球藻稀释液的质量比为0.8-2.4：100；酶处理的温度为45-55℃，处理时间为8-12小时。

4.如权利要求1所述的小球藻生长因子（CGF）提取工艺，其特征在于，步骤（4）中，所述的梯度过滤膜组依次包括微滤膜、超滤膜、纳滤膜和反渗透膜。

5.如权利要求1所述的小球藻生长因子（CGF）提取工艺，其特征在于，步骤（4）中，对小球藻酶处理液所进行的灭活处理的条件为90-100℃，处理时间为10-20min。

6.如权利要求1所述的小球藻生长因子（CGF）提取工艺，其特征在于，所述的破壁酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶的混合物，其中含有纤维素酶30-40%，含有半纤维素酶25-30%，含有果胶酶20-25%，余量为蛋白酶。

7.如权利要求4所述的小球藻生长因子（CGF）提取工艺，其特征在于，

使用微滤膜对小球藻溶液进行过滤时，微滤温度35-50℃， 微滤压力0.1-0.3MPa，微滤流速30-60L/m².h，微滤膜孔径 0.05-1.0μm，微滤膜厚度10-150μm；

使用超滤膜对小球藻微滤液进行超滤时，超滤温度55-60℃，超滤压力0.5-0.8MPa，超滤流速 10-20L/m².h，膜孔径0.015-0.1μm，超滤膜厚度150-250μm；

使用纳滤膜对小球藻超滤液进行过滤时，纳滤温度55-60℃，纳滤压力2-3.5MPa，纳滤流速2.5-4.0L/m².h，纳滤膜孔径3-8nm，纳滤膜厚度150-200μm；

使用反渗透膜对小球藻纳滤液进行过滤时，所述的反渗透膜时的压力为1.5-1.8 MPa。