[发明专利]土壤修复用多孔微生物制剂的制备方法

权利要求书

1.一种土壤修复用多孔微生物制剂的制备方法，其特征在于，该制备方法包括以下步骤：

1)将节杆菌(Arthrobacter sp.)LHM7719发酵液和沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)发酵液按照质量比为1∶1.2～1.5的比例混合均匀，得到复合菌剂；向所述复合菌剂中加入ACC脱氨酶，混合均匀，即得复合微生物菌液；

2)将硅藻土、海藻酸钠、碳酸钙和氯化钙以1∶1～2∶0.2～0.3∶0.2～0.3的质量比在水中混合，超声分散均匀，加入步骤1)制得的复合微生物菌液，混合均匀得到分散液；

3)向浓度为0.05～0.1mol/L的硫酸镁溶液中逐滴滴加步骤2)制得的分散液，生成球状颗粒沉淀，离心分离所述球状颗粒沉淀，向分离得到的球状颗粒沉淀中缓慢滴加稀盐酸溶液，直至无气泡生成，用水洗涤得到的固体物质，离心，干燥，即得所述微生物制剂，

步骤2)中，加入的硅藻土、海藻酸钠、碳酸钙和氯化钙的总质量与所述复合微生物菌液的质量之比为0.2～0.3∶1，

所述复合微生物菌液中，节杆菌(Arthrobacter sp.)LHM7719发酵液的活菌含量为5×10⁸～5×10¹⁰cfu/g，沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)发酵液的活菌含量为5×10⁹～5×10¹¹cfu/g，ACC脱氨酶的浓度为25～35U/mg。

2.根据权利要求1所述的土壤修复用多孔微生物制剂的制备方法，其特征在于，所述节杆菌(Arthrobacter sp.)LHM7719发酵液的制备方法包括：将节杆菌(Arthrobacter sp.)LHM7719培养到对数期，然后按培养基体积2％～5％的接种量将培养到对数期的菌种接种到LB培养基中，25～37℃下，摇床震荡120～180rpm，培养40～48小时，得到节杆菌(Arthrobacter sp.)LHM7719发酵液。

3.根据权利要求1所述的土壤修复用多孔微生物制剂的制备方法，其特征在于，沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)为沼泽红假单胞菌2-8(Rhodopseudomonaspalustris2-8)。

4.根据权利要求1所述的土壤修复用多孔微生物制剂的制备方法，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)发酵液的制备方法包括：将沼泽红假单胞菌2-8(Rhodopseudomonas palustris 2-8)培养到对数期，然后按培养基体积2％～5％的接种量将培养到对数期的菌种接种到培养基A中，光照厌氧条件下，28～30℃下培养48～96小时，得到所述沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)发酵液；所述培养基A包括水和以下质量分数的组分：氯化铵0.1％、磷酸氢钠0.05％、硫酸镁或氯化镁0.02％、氯化钠0.2％、酵母膏或蛋白胨0.1～0.2％，所述培养基A的pH为6.8～7.1。

5.根据权利要求1所述的土壤修复用多孔微生物制剂的制备方法，其特征在于，所述碳酸钙由粒径为200～300目的碳酸钙颗粒组成。

6.根据权利要求1所 述的土壤修复用多孔微生物制剂的制备方法，其特征在于，所述稀盐酸溶液浓度为0.01～0.05mol/L。