[发明专利]ACRBP蛋白385位C-33.987在制备重度少弱精诊断试剂中的应用

说明书

本发明公开了ACRBP蛋白385位发生‑33.987±0.005质量偏移的半胱氨酸作为生物标志物在制备重度少弱精的诊断试剂中的用途。本发明发现：通过ACRBP蛋白385位发生‑33.987±0.005质量偏移的半胱氨酸的检验频次可以用来诊断重度少弱精症，为重度少弱精症提供了新的诊断和治疗靶点。

技术领域

本发明涉及医学和分子诊断技术领域，具体涉及一种ACRBP蛋白385位发生-33.987±0.005质量偏移的半胱氨酸作为标志物在制备重度少弱精诊断试剂中的用途。

背景技术

据世界卫生组织调查，15％的育龄夫妇存在不育问题，不育症已成为影响人类健康与社会发展的一个全球性医学和社会问题(Turner,T.T.and J.J.Lysiak,Oxidativestress:a common factor in testicular dysfunction.J Androl,2008.29(5):p.488-98)。如果a级精子数25％，(a+b)级精子数50％，且精子活率低于60％的话就可诊断为弱精子症。少精子症是指精液中的精子数目低于正常具有生育能力男性的一种病症，当男性的精子在每毫升低于2千万时，就为少精子症。虽然现今关于少弱精子症的发病机制的研究很多，但是其确切机制尚不明朗，这也阻碍了其新的治疗手段的发展。由于精子成熟后其转录和翻译处于停滞状态，这就为研究人员在蛋白质组及其翻译后修饰水平上研究少弱精子症的生理病理机制提供了方便。

目前关于精子蛋白质组的研究有很多，总共大约鉴定了6238个非冗余蛋白(Semenproteomics and male infertility，Meritxell Jodar,Ada Soler-Ventura,RafaelOliva，Molecular Biology ofReproduction and Development Research Group，JournalofProteomics 162(2017)125–134)。目前最新更新的人类精子蛋白质组Amaral等完成，共鉴定了6198个蛋白(AmaralA,Castillo J,Ramalho-Santos J,Oliva R.The combinedhuman sperm proteome:cellular pathways and implications for basic andclinical science.Human reproduction update,20(1),40-62(2014))。Mayank等利用差异蛋白质组学的方法在5组健康人和8组少弱精子症患者的精子细胞中定量了667个蛋白，精浆中定量了447个蛋白，分许出了8个显著下调蛋白，并对其进行了通路分析(HumanSpermatozoa Quantitative Proteomic Signature Classifies Normo-andAsthenozoospermia，Mayank Saraswat,Sakari Joenvaara,Tushar Jain,Anil KumarTomar,Ashima Sinha,Sarman Singh,Savita Yadav,and Risto Renkonen，Mol CellProteomics.2017Jan；16(1):57-72)。为了研究无精症的分子机制，Mehdi等利用非标记定量蛋白质组学方法在人阻塞性和非阻塞性无精症的睾丸组织中找到了520个显著性变化蛋白，包括几种关键转录因子，这也为研究精子发生和人类生殖的分子调控机制奠定了基础(Quantitative proteomic analysis offhuman testis reveals system-widemolecular and cellular pathways associated with non-obstructive azoospermia，MehdiAlikhani，MehdiMirzaei，MarjanSabbaghian，PouriaParsamatin，RaziehKaramzadeh，SamaneAdib，NiloofarSodeifi，Mohammad Ali SadighiGilani，MasoudZabet-Moghaddam，LindsayParker，YunqiWu，VivekGupta，Paul A.Haynes，HamidGourabi，HosseinBaharvand，Ghasem HosseiniSalekdeh，Journal of Proteomics，Volume 162,6June 2017,Pages 141-154)。成熟精子翻译转录活动的沉默也使其成为研究翻译后修饰的理想细胞模型，但是关于基于质谱的精子翻译后修饰大规模研究还是很少。关于修饰的研究主要集中于磷酸化，糖基化，乙酰化和泛素化(The Challenge of HumanSpermatozoa Proteome:A Systematic Review，Kambiz Gilany,Arash Minai-Tehrani,Mehdi Amini,Niloofar Agharezaee,Babak Arjmand，J Reprod Infertil.2017Jul-Sep；18(3):267–279.)。络氨酸磷酸化对于精子的运动、获能、超激运动等过程重要作用。Chying-Chyuan Chan等通过对20组正常人和弱精症患者的精子进行蛋白质组学分析发现有12种包括TUBGCP2在内的蛋白发生了过磷酸化。非编码氨基酸包括翻译后修饰和氨基酸突变是调控蛋白功能和结构的重要方式，因此将疾病状态下异常的或者数量变化极大的非编码氨基酸作为疾病的生物标志物进而用于诊断疾病的进程具有重要意义。