[发明专利]生产目标物质的方法

权利要求书

1.生产目标物质的方法，所述方法包括：

通过使用具有生产所述目标物质的能力的微生物来生产所述目标物质，

其中所述微生物是属于棒状杆菌属的细菌，

其中所述微生物具有选自下组的特征(A)：

(A-i) 所述微生物已经以使AICAR甲酰转移酶和/或IMP环水解酶的活性相比于未修饰菌株降低的方式进行了修饰，

(A-ii) 所述微生物已经以使编码AICAR甲酰转移酶和/或IMP环水解酶的基因具有突变的方式进行了修饰，所述突变改善所述微生物生产所述目标物质的能力，和

(A-iii) 其组合，

其中所述目标物质选自下组：

(X) 代谢物，选自下组：香草醛、香草酸、褪黑激素、麦角硫因、麦根酸、阿魏酸、多胺、愈创木酚、4-乙烯基愈创木酚、4-乙基愈创木酚、肌酸，及其组合；

(Y) L-甲硫氨酸；和

(Z) 其组合。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述生产包括：

在含有碳源的培养基中培养所述微生物以在所述培养基中生产和积累所述目标物质。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述生产包括：

通过使用所述微生物将所述目标物质的前体转化为所述目标物质。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述使用：

在含有所述前体的培养基中培养所述微生物以在所述培养基中生产和积累所述目标物质。

5.根据权利要求3所述的方法，其中所述转化包括：

允许所述微生物的细胞在反应混合物中作用于所述前体以在所述反应混合物中生产和积累所述目标物质。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述细胞是存在于所述微生物的培养液中的细胞、从所述培养液收集的细胞、存在于所述培养液的加工产品中的细胞、存在于所述收集的细胞的加工产品中的细胞、或这些的组合。

7.根据权利要求3至6中任一项所述的方法，其中所述前体选自下组：原儿茶酸、原儿茶醛、L-色氨酸、L-组氨酸、L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-精氨酸、L-鸟氨酸、甘氨酸，及其组合。

8.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，所述方法进一步包括收集所述目标物质。

9.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述AICAR甲酰转移酶和/或IMP环水解酶由purH基因编码。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述purH基因编码SEQ ID NO: 135的氨基酸序列的蛋白质。

11.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述AICAR甲酰转移酶和/或IMP环水解酶的活性通过选自下组的方式降低：

(A) 弱化编码AICAR甲酰转移酶和/或IMP环水解酶的基因的表达；

(B) 破坏编码AICAR甲酰转移酶和/或IMP环水解酶的基因；

(C) 修饰编码AICAR甲酰转移酶和/或IMP环水解酶的基因而使得该基因具有改善所述微生物生产所述目标物质的能力的突变；和

(D) 其组合。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述弱化或所述破坏包括缺失编码AICAR甲酰转移酶和/或IMP环水解酶的基因。

13.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述微生物是谷氨酸棒状杆菌。

14.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述微生物已经以使参与所述目标物质的生物合成的酶的活性相比于未修饰菌株增加的方式进行了进一步的修饰。