[发明专利]一种防治新型鸭呼肠孤病毒的灭活疫苗及其制备方法在审
申请号: | 201810494572.8 | 申请日: | 2018-05-22 |
公开(公告)号: | CN108498794A | 公开(公告)日: | 2018-09-07 |
发明(设计)人: | 刁有祥;唐熠;高斌 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | A61K39/15 | 分类号: | A61K39/15;A61P31/14 |
代理公司: | 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 | 代理人: | 李茜 |
地址: | 271018 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 呼肠孤病毒 灭活疫苗 制备 雏鸭 防治 疫苗 规模化生产 抗体水平 免疫保护 指标检测 保藏 病毒液 持续期 灭活 鸭群 生产工艺 感染 预防 治疗 | ||
1.一种防治新型鸭呼肠孤病毒的灭活疫苗,其特征在于,所述灭活疫苗含有预防或治疗上有效量的灭活的鸭呼肠孤病毒株病毒液;所述鸭呼肠孤病毒株的保藏编号为CCTCCNO:V201818。
2.根据权利要求1所述的灭活疫苗,其特征在于,所述鸭呼肠孤病毒株病毒液由如下方法制备而成:
将保藏编号为CCTCC NO:V201818的鸭呼肠孤病毒株接种到LMH细胞系中,对鸭呼肠孤病毒进行增殖培养后,通过冻融破碎细胞,收取上清液,并进行纯化,即得鸭呼肠孤病毒株病毒液。
3.根据权利要求1所述的灭活疫苗,其特征在于,鸭呼肠孤病毒株病毒液灭活的方法为:加入终浓度为0.2%的甲醛,37℃搅拌灭活16h。
4.根据权利要求1所述的灭活疫苗,其特征在于,所述灭活疫苗中还含有佐剂。
5.权利要求1-4任一项所述的灭活疫苗的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将保藏编号为CCTCC NO:V201818的鸭呼肠孤病毒接种到LMH细胞系中,对鸭呼肠孤病毒进行增殖培养后,通过冻融破碎细胞,收取上清液,并进行纯化,获得鸭呼肠孤病毒株病毒液;
(2)将鸭呼肠孤病毒株病毒液灭活,加入Tween- 80混合作为水相,以白油、硬脂酸铝和Span-80混合作为油相,将油相和水相按1:1混合均匀,乳化,得到防治新型鸭呼肠孤病毒的灭活疫苗;
步骤(2)中,所述水相中Tween- 80的终浓度为2%-4%。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,鸭呼肠孤病毒株病毒液灭活的方法为:加入终浓度为0.2%的甲醛,37℃搅拌灭活16h。
7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述白油、硬脂酸铝和Span-80的比例为94:2:6。
8.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,油相和水相混合的方法为:将水相加入到油相中,6000rpm混合10min。
9.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述乳化具体为:8000r/min乳化20min。
10.保藏编号为CCTCC NO:V201818的鸭呼肠孤病毒在制备预防或治疗鸭跗关节肿胀的灭活疫苗中的应用;所述鸭跗关节肿胀是由鸭呼肠孤病毒引起的。
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