[发明专利]甘草查耳酮A在制备治疗鸡坏死性肠炎药物中的用途

说明书

本发明公开了甘草查耳酮A在治疗鸡坏死性肠炎中的用途，通过产气荚膜梭菌滑动运动抑制试验、生物被膜形成抑制试验以及雏鸡坏死性肠炎模型试验证甘草查耳酮A对产气荚膜梭菌感染所致的鸡坏死性肠炎具有保护作用。由于传统抗生素的滥用和细菌耐药性的不断加强，甘草查耳酮A具有治愈率高，无耐药性及药物残留的特点，因此甘草查耳酮A用于治疗鸡坏死性肠炎可以增加使用药物的选择性,对开发新药和有着重要意义。

技术领域

本发明公开了甘草查耳酮 A在治疗鸡坏死性肠炎中的用途，涉及甘草查耳酮 A在制备治疗鸡坏死性肠炎药物中的应用，属于医药技术领域。

背景技术

产气荚膜梭菌是一种厌氧性革兰氏阳性芽孢杆菌，广泛存在于自然界的土壤、水体、食物、人畜粪便、家畜饲料及动物肠道中，是人和动物的正常肠道菌群，属条件致病菌。目前根据其分泌的外毒素不同，将其分为A-E 共个5血清型，家禽主要感染A型及C型产气荚膜梭菌，尤以A型为主。产气荚膜梭菌感染家禽后，主要引起坏死性肠炎，其症状表现为鸡只精神委靡、羽毛松乱、食欲减少或废绝，排血便，生产性能严重下降。病变主要集中在小肠部位，表现为肠壁变薄，有局灶性或成片的肠粘膜坏死脱落。据有关研究统计，全球家禽行业因坏死性肠炎造成的经济损失高达数十亿美元，严重危害了家禽养殖业的发展。

产气荚膜梭菌在肠道内的粘附定植主要是通过其四型菌毛（Type IV pili，TFP)介导的。TFP是一种存在于细菌细胞膜上的一种运动器官，TFP使得产气荚膜梭菌具有在其自然生境和软硬琼脂等半固体的介质表面运动的能力，这种特殊的运动方式被称作滑动运动（Gliding motility）。据研究表明，包括产气荚膜梭菌在肠道的粘附定植、滑动运动、生物被膜的形成等细菌功能都与TFP具有一定的联系。通过抑制产气荚膜梭菌TFP的功能，能够干扰细菌在肠道内的粘附定植，从而达到抗产气荚膜梭菌感染的目的。

通过在饲料中添加抗生素是预防并治疗家禽感染坏死性肠炎的主要手段，然而，由于抗生素大量使用所致的细菌耐药性问题及抗生素残留问题对公众健康造成了严重威胁，因此，开发安全有效的抗生素替代物正日益成为研究的热点。天然化合物具有毒性较低、来源丰富、安全范围广等优点，是筛选抗生素替代物的重要资源。

甘草查尔酮 A是从中药甘草中提取得到的一种查尔酮类化合物，主要存在于豆科植物甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根茎。目前的研究表明，甘草查耳酮 A具有包括抗炎、抗菌、抗肿瘤及抗寄生虫等多种生物学活性。然而，截至目前国内外尚无甘草查耳酮 A用于治疗产气荚膜梭菌所致鸡坏死性肠炎的相关研究。

发明内容

本发明提供了甘草查耳酮 A在治疗鸡坏死性肠炎中的医用用途，对产气荚膜梭菌所致的鸡坏死性肠炎具有良好的治疗效果。

本发明所述的甘草查耳酮 A的分子结构如下所示：

分子式为：C₂₁H₂₂O₄ ；分子量：338.39698。

本发明通过产气荚膜梭菌滑动运动抑制试验、生物被膜形成抑制试验以及雏鸡坏死性肠炎模型试验证甘草查耳酮 A对产气荚膜梭菌感染所致的鸡坏死性肠炎具有保护作用：

一、滑动运动抑制试验：

产气荚膜梭菌标准株ATCC13124于液体BHI培养基37 ℃厌氧培养12 h，之后取300μl该培养物继续培养于液体BHI中，37 ℃厌氧培养5 h。取1 ml培养物，10000 g离心弃上清，菌体重悬于500 μl BHI液体培养基中，使之二倍浓缩。之后取5 μl浓缩的菌液分别滴加于预先制备并于37 ℃烘箱干燥1 h的含8 μg/ml、32 μg/ml甘草查耳酮 A的0.7% BHIA的平板上，37 ℃厌氧培养48 h，采集图像(参见图1)。结果表明，8μg/ml及32μg/ml甘草查耳酮 A均能显著抑制产气荚膜梭菌在BHIA上的滑动运动，且32μg/ml甘草查耳酮 A作用效果更为明显。