[发明专利]一种促进北虫草产胞外物质的发酵培养基

说明书

本发明提供了一种可以促进北虫草产胞外多糖和胞外蛋白的发酵培养基，属于微生物发酵领域。所述培养基是取土豆200g，切成小块，与20g葡萄糖一起加到1000ml水中，煮沸，过滤后在滤液中加入7‑8g南非叶粉，加水补齐至1000ml后灭菌制得。在相同条件下，使用本发明所述发酵培养基进行北虫草的液态发酵，其胞外多糖和胞外蛋白的产量至少是不加南非叶所得对照培养基的3.9倍和3.57倍，且该培养基制作简单，操作方便，生产加工成本低，能够适应工厂化的生产与使用。

技术领域

本发明属于微生物发酵领域，具体涉及一种促进北虫草产胞外物质（胞外多糖和胞外蛋白）的发酵培养基。

背景技术

北虫草又名北冬虫夏草，与冬虫夏草同属真菌。作为我国名贵的中药材，北虫草具有广泛的药理作用，在功能食品和医药等方面有很好的实用价值，其中虫草多糖和虫草蛋白是北虫草中含量最多的两种药理活性物质。目前，北虫草的培养方式为固体发酵和深层液体发酵，传统的固态发酵方式可以获得北虫草子实体，进而提取获得多糖等活性物质，但是固体发酵产量小，周期较长，耗费人力，已经不能满足人们日以增进的需求。大量研究表明，人工发酵产生的虫草多糖和虫草蛋白同样具有良好的抗肿瘤、降血糖、抗氧化和提高免疫能力等多种药理活性。目前对虫草多糖和虫草蛋白的研究集中于其活性成分和机理研究，而对能够提高其产胞外多糖和胞外蛋白的发酵培养基研究很少。

发明内容

本发明的目的在于提供一种促进北虫草产胞外物质的发酵培养基，其能够明显提升北虫草液体发酵中胞外多糖及胞外蛋白的产量。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种促进北虫草液体发酵产胞外多糖和胞外蛋白的发酵培养基，其是取土豆200g，切成小块，与20g葡萄糖一起加到1000ml水中，煮沸10min后过滤弃渣，收集滤液；加入7-8g南非叶粉混匀后加水补齐至1000ml，121℃灭菌30min制得。

在北虫草液体发酵中，可按2.5~7.5vol.%的接种量将北虫草接种至所述发酵培养基中进行发酵培养。发酵培养为摇床发酵，其转速为160 rpm/min，发酵温度为25℃。

本发明的显著优点在于：在相同条件下，使用本发明所述发酵培养基进行北虫草的液态发酵，其胞外多糖和胞外蛋白的产量至少是不加南非叶所得对照培养基的3.9倍和3.57倍，且本发明培养基制作简单，操作方便，生产加工成本低，能够适应工厂化的生产与使用。

附图说明

图1为采用未添加南非叶（A）与添加南非叶（B）的培养基进行北虫草液体发酵后所得发酵液的对比图。

图2为南非叶添加量对虫草胞外多糖（A）及胞外蛋白（B）产量的影响情况图。

具体实施方式

取土豆200g，切成小块，与20g葡萄糖一起加到1000ml水中，煮沸10min后过滤弃渣，收集滤液；加入0-10g南非叶粉混匀后加水补齐至1000ml，121℃灭菌30min，制得用于北虫草液体发酵的培养基。

采用250 ml锥形瓶，加入100 ml培养基，按7.5 vol.%的接种量将北虫草接种至培养基中，于25℃、160 rpm/min进行摇床发酵。

胞外多糖含量的测定：过滤，收集滤液，加4倍体积95%工业酒精醇沉过夜，离心后去上清，沉淀加去离子水溶解，采用苯酚-硫酸法对北虫草胞外多糖进行测定。

胞外蛋白含量的测定：过滤，收集滤液，采用考马斯亮蓝法对北虫草胞外蛋白进行测定。

由图2可见，加入南非叶粉时北虫草胞外多糖和胞外蛋白的产量比未加南非叶时有显著性的提高，当南非叶添加量在7-8g范围内时，所产生胞外多糖及胞外蛋白的含量最高。

为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。