[发明专利]一种胶体金利用标记羊抗鼠二抗后间接连接鼠抗标记的金标免疫层析试纸条的制备方法

权利要求书

1.一种胶体金利用标记羊抗鼠二抗后间接连接鼠抗标记的金标免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)利用柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金溶液，制备的胶体金粒径在范围内；

(2)利用胶体金溶液标记羊抗鼠二抗，使用0.1M碳酸钾溶液调整胶体金溶液的PH接近羊抗鼠二抗的等电点，从而使胶体金溶液与羊抗鼠二抗形成牢固结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响抗体的生物特性；除此之外，标记过程中还需注意体系中的离子浓度以及蛋白质纯度，并在标记后通过离心浓缩的方式对胶体金溶液进行纯化及浓缩；

(3)将需要标记的鼠抗加入到上述标记羊抗鼠二抗的胶体金溶液，需要标记的鼠抗是利用羊抗鼠间接连接在胶体金溶液上，由于胶体金溶液上标记了羊抗鼠二抗，所以鼠抗加入后能通过羊抗鼠二抗间接标记在胶体金溶液上；

(4)将上述间接标记鼠抗的胶体金溶液处理在结合垫上，需要注意处理的均一性以及干燥保存条件；

(5)将对应抗原处理在硝酸纤维素膜上，将对应的抗原用1×PBS溶液稀释到合适浓度后，使用划膜仪处理在硝酸纤维素膜上；

(6)将硝酸纤维素膜、吸水纸、结合垫、样品垫贴于PVC塑料底板上，切条并干燥保存，结合垫为聚酯膜；如果是卡壳或笔型试纸，则需要将试纸条放置在卡壳的指定槽内；

(7)将制备好的金标免疫层析试纸条按照产品质量标准进行质量鉴定。

2.根据权利要求1所述的一种胶体金利用标记羊抗鼠二抗后间接连接鼠抗标记的金标免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中使用的还原剂为柠檬酸三钠。

3.根据权利要求1所述的一种胶体金利用标记羊抗鼠二抗后间接连接鼠抗标记的金标免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中胶体金的直接标记抗体是羊抗鼠二抗。