[发明专利]日本血吸虫SjELAV-like 1基因的siRNA及其应用

说明书

本发明公开了一种日本血吸虫SjELAV‑like 1基因的siRNA，所述siRNA为：SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。本发明还公开了日本血吸虫SjELAV‑like 1基因的siRNA的应用。本发明日本血吸虫SjELAV‑like 1基因的siRNA，可明显抑制SjELAV‑like 1基因的转录，并能显著降低血吸虫感染小鼠的肝脏荷卵数和虫卵孵化率，对血吸虫体被结构造成了一定的损伤，并造成生殖细胞的形态异常，适用于制备治疗血吸虫病的药物。

技术领域

本发明涉及分子生物学和生物医药技术领域，尤其涉及一种日本血吸虫SjELAV-like 1基因的 siRNA 及其应用。

背景技术

血吸虫病(Schistosomiasis)是一种分布广泛、危害严重的人畜共患寄生虫病，呈地方性流行；血吸虫性成熟雌虫产生的大量虫卵在动物肝脏中形成的肉芽肿是导致宿主损伤的根本原因，而大量虫卵排出体外又造成血吸虫病的传播和流行。目前，主要采用药物，例如吡喹酮，对已经感染血吸虫病的人或动物进行治疗，但是这些药物不能够防治血吸虫病的再次感染，因此，有必要寻找新的治疗血吸虫病的药物。此外，抗原伪装和抗原模拟是血吸虫免疫逃避的重要机制，这也是没有一种安全性高、特异性强的疫苗可以广泛应用于控制血吸虫病的原因，故研究有效的抗原靶点对血吸虫疫苗、药物靶标和诊断工具的开发方面具有潜在应用价值。

ELAV (embryonic lethal abnormal vision) -like 是一类家族基因，该家族成员最早在果蝇体内发现，因其有胚胎期致死及视觉异常表型而得名。该家族基因编码的RNA结合蛋白在基因的转录后调节中通过影响mRNA转运、定位和翻译，控制蛋白的时空表达，并调控RNA与蛋白质的结合及其相互作用，决定基因表达最终产物的类型和表达量，从而发挥不同的生物学功能。ELAV-like 1是该家族成员之一，在果蝇神经元中特异性表达，它通过转录后调控限制神经突触的生长发育，对神经系统的发育和维持有重要作用。在人类中与ELAV-like 1同源的基因HuR在各种细胞中广泛表达，通过与ARE(AU-rich element) 元件的结合调节mRNA的稳定性，它的异常表达会导致生长发育异常、自身免疫和肿瘤等疾病的发生。HuR对胚盘的形态学发生和血管形成以及胎儿的维持有重要作用，它的缺失导致胚胎致死型或胚胎发育异常。果蝇中与ELAV-like同源的RBP9不仅对神经元成熟有重要作用，还与卵母细胞的分化有关，RBP9突变导致卵子缺陷，引起雌性不孕。但是尚没有针对日本血吸虫中ELAV-like 1基因的深入研究。

RNA干扰（RNAi）是发生在mRNA水平上的一种基因沉寂现象，即将外源性双链RNA（dsRNA）引入细胞后可以引起细胞内与其同源的mRNA特异性降解，使该基因在RNA水平上被关闭而致其不表达，即转录后基因沉寂，从而产生相应的功能表型缺失。该技术目前已经在功能基因组学、基因治疗、微生物学研究和药物研发等领域里取得了令人瞩目的进展。小分子干扰RNA（small interfering RNAs，siRNAs），是一种短片段双链RNA分子，通常由20个左右核苷酸组成，能够以同源互补序列mRNA为靶标并将其降解，从而介导特异性RNA干扰途径的进行，使转录后基因沉默。siRNA已经广泛应用于基因表达调控机制研究等领域。

发明内容