[发明专利]一种PM2.5致肺损伤拮抗剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种PM_2.5致肺损伤拮抗剂及其制备方法，该拮抗剂由羊肚菌子实体多糖经硫酸化修饰获得，主要由甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成，分子量为9.0kDa，硫酸根取代度为1.36。本发明获得的多糖组分SFMP‑1对于PM_2.5损伤的肺泡巨噬细胞具有很好的保护作用，且无明显毒副作用，显示出其具有良好的拮抗PM_2.5损伤作用，在医药及保健品等领域具有巨大的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种PM_2.5致肺损伤拮抗剂及其制备方法，属于生物技术领域。

背景技术

近几年，随着我国经济的迅猛发展以及化石燃料的大面积使用，我们正在面临并遭受着严峻的考验—大气污染。其中包含PM_2.5。PM_2.5，又称细颗粒物，它是指一种直径小于或等于2.5μm的颗粒物。我国现在的PM_2.5水平要比世界卫生组织推荐的正常值高出八倍，被认为是世界上PM_2.5水平最高的国家之一。尤其是华北平原，频繁的雾霾天气给人民的生活和出行带来了深重的灾难。由于PM_2.5粒子的尺寸，它可以进入到人类的肺部和血液中，给生物系统带来引起严重的影响，甚至会摧毁人类的健康。根据一些风险疾病的评估，雾霾已经成为东亚地区第四大高危风险，且已经导致了中国120万人死亡。流行性病学研究进一步指出长期暴露于室外的雾霾中尤其是PM_2.5中还会增加罹患呼吸系统和心血管系统疾病的风险。因此寻找PM_2.5拮抗剂具有重要的科学意义和应用价值。

长期以来，食用菌多糖因其独特的免疫调节作用而受到广泛关注。羊肚菌作为一种味道鲜美、营养丰富的珍稀食用菌，其醇提物和粗多糖具有抗肿瘤、护肝、抗氧化等活性。实验室前期从羊肚菌子实体中提取的多糖均一组分FMP-1具有很好的抗氧化活性，而对于拮抗PM_2.5致肺损伤的活性还未见报道。此外，研究表明多糖的化学修饰可以通过引入新的化学基团提高自身的生物活性以及产生新的活性，常见的多糖化学修饰方法有多糖的硫酸化、羧甲基化、乙酰化、磷酸化以及烷基化等，通过适当的分子修饰获得高效的多糖基PM_2.5拮抗剂也未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种PM_2.5致肺损伤拮抗剂及其制备方法，无任何毒副作用，且具有良好的抵抗PM_2.5致肺泡巨噬细胞损伤作用，在医药及保健品等领域具有巨大的应用前景。

本发明PM_2.5致肺损伤拮抗剂，为羊肚菌硫酸化多糖SFMP-1，分子量为9.0kDa，硫酸根取代度为1.36，其单糖组成主要有甘露糖、葡萄糖和半乳糖，摩尔比为1:7.84:1.24。

本发明PM_2.5致肺损伤拮抗剂的制备方法，包括如下步骤：

步骤1：取100mg干燥的羊肚菌多糖FMP-1置于洁净干燥的三颈烧瓶，加入甲酰胺5mL，25℃下水浴30min，随后加入200mg SO₃-Py，70℃下油浴搅拌反应3h；

步骤2：用NaOH溶液(4mol/L)调步骤1获得的反应液的pH值至中性，透析，所得透析液浓缩，加入四倍体积的95vt％乙醇，4℃下静置12h，离心，收集沉淀，所得沉淀经冷冻干燥得到羊肚菌硫酸化多糖SFMP-1。

步骤2中，所述透析是采用3500Da透析袋，流水透析48h。

步骤2中，所述冷冻干燥的参数为：温度-50℃，气压0.1mbar，时间72h。

本发明PM_2.5致肺损伤拮抗剂的表征，包括如下内容：