[发明专利]一种促进产谷氨酰胺转胺酶的茂源链霉菌快速生长的培养基及其配制方法和应用

说明书

本发明公开了一种促进产谷氨酰胺转胺酶的茂源链霉菌快速生长的培养基，其组分及质量体积比为：可溶性淀粉16～24g/L、KNO₃0.8～1.2g/L、MgSO₄·7H₂O0.4～0.6g/L、K₂HPO₄·3H₂O 0.4～0.6g/L、NaCl 0.4～0.6g/L、FeSO₄·7H₂O0.008～0.012g/L、碱性氨基酸0.1～2g/L，琼脂20g/L，pH值6～8。本发明采用产谷氨酰胺转胺酶的茂源链霉菌为实验菌株，在上述配制的培养基上，培养四天的菌苔的厚实度与不加碱性氨基酸的对照培养基上培养七天的菌苔厚实度差异不明显。将本发明所述的培养基上生长四天的菌苔进行种子及发酵培养，获得的谷氨酰胺转胺酶产量与培养七天的对照组相比无明显差异。本发明显著降低了产谷氨酰胺转胺酶的茂源链霉菌的生长时间，大大提高了工业生产效率。

技术领域

本发明属于微生物育种领域，具体涉及一种促进产谷氨酰胺转胺酶的茂源链霉菌快速生长的培养基及其配制方法和应用。

背景技术

谷氨酰胺转胺酶(Transglutaminase，简称TGase，EC 2.3.2.13)通过催化蛋白质分子内及分子间发生酰基转移反应，使产品获得良好的功能性质。谷氨酰胺转胺酶被FDA批准为“通用安全认证(GRAS)”添加剂，广泛应用于食品、纺织、医药等领域，在动物、植物、微生物中相继发现了TGase的存在，其中微生物发酵生产的TGase因无需依赖Ca²⁺、具有成本低廉等优势被应用于工业生产中。

茂源链霉菌是工业生产TGase的主要生产菌株，其生产的MTG创造了巨大的商业价值。然而茂源链霉菌的生长周期比较长，田淑翠等报道茂源链霉菌在高氏一号平板上生长七天后，菌苔才比较厚实，才可用于后续的扩大培养(田淑翠，牛延宁等.中国生物工程杂志，2016(09)：47-53)，最终获得谷氨酰胺转胺酶需要9.5天，工业生产中的时间成本较高。

氨基酸作为一种生长因子对微生物的生长及目标产物的积累有着较大影响，很多学者通过在发酵培养基中添加氨基酸，可促进菌体生长及产酶，但至今尚未有添加氨基酸于高氏一号平板中，促进菌体生长以缩短其生长周期的报道。

发明内容

本发明旨在提供一种促进产谷氨酰胺转胺酶的茂源链霉菌快速生长的培养基，缩短茂源链霉菌生长时间，以利于工业化生产过程中显著缩短培养周期，降低生产成本，提高培养效率。

本发明首要解决的技术问题是提供一种促进产谷氨酰胺转胺酶的茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis)快速生长的培养基以及其制作方法和使用方法。

为解决以上技术问题，本发明提供以下技术方案：本发明提供了一种促进产谷氨酰胺转胺酶的茂源链霉菌快速生长的培养基，其组成成分及质量体积比为：可溶性淀粉16～24g/L、KNO₃0.8～1.2g/L、MgSO₄·7H₂O 0.4～0.6g/L、K₂HPO₄·3H₂O 0.4～0.6g/L、NaCl0.4～0.6g/L、FeSO₄·7H₂O 0.008～0.012g/L、碱性氨基酸0.1～2g/L、琼脂20g/L，pH值：6～8。

优选地，为可溶性淀粉20g/L、KNO₃1g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L、K₂HPO₄·3H₂O 0.5g/L、NaCl 0.5g/L、FeSO₄·7H₂O 0.01g/L、琼脂20g/L，碱性氨基酸0.1～2g/L，pH值7.4。