[发明专利]靶向CD19和CD22嵌合抗原受体及其用途

权利要求书

1.一种多核苷酸序列，所述多核苷酸序列选自：

(1)含有依次连接的抗CD19和抗CD22单链抗体的编码序列、人CD8铰链区的编码序列、人CD8跨膜区的编码序列、人41BB胞内区的编码序列、人CD3ζ胞内区的编码序列和任选的EGFR的含胞外结构域III和胞外结构域IV的片段的编码序列的多核苷酸序列；和

(2)(1)所述多核苷酸序列的互补序列。

2.如权利要求1所述的多核苷酸序列，其特征在于，

在所述抗CD19单链抗体的编码序列前的所述信号肽的编码序列如SEQ ID NO:1第1-66位核苷酸序列所示；和/或

所述抗CD19单链抗体的轻链可变区的编码序列如SEQ ID NO:1第67-387位核苷酸序列所示；和/或

所述抗CD22单链抗体的重链可变区的编码序列如SEQ ID NO:1第403-774位核苷酸序列所示；和/或

所述抗CD22单链抗体的轻链可变区的编码序列如SEQ ID NO:1第829-1149位核苷酸序列所示；和/或

所述抗CD19单链抗体的重链可变区的编码序列如SEQ ID NO:1第1165-1524位核苷酸序列所示；和/或

所述人CD8铰链区的编码序列如SEQ ID NO:1第1531-1671位核苷酸序列所示；和/或

所述人CD8跨膜区的编码序列如SEQ ID NO:1第1672-1737位核苷酸序列所示；和/或

所述人41BB胞内区的编码序列如SEQ ID NO:1第1738-1878位核苷酸序列所示；和/或

所述人CD3ζ胞内区的编码序列如SEQ ID NO:1第1879-2214位核苷酸序列所示。

3.一种融合蛋白，所述融合蛋白选自：

(1)含有依次连接的抗CD19单链抗体、抗CD22单链抗体、人CD8铰链区、人CD8跨膜区、人41BB胞内区和人CD3ζ胞内区的融合蛋白和任选的EGFR的含胞外结构域III和胞外结构域IV的片段的编码序列；和

(2)在(1)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且保留活化T细胞活性的由(1)衍生的融合蛋白；

优选地，所述抗CD19单链抗体为抗CD19单克隆抗体FMC63。

优选地，所述抗CD22单链抗体为抗CD22单克隆抗体M971。

4.如权利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白具有以下一个或多个特征：

所述融合蛋白在所述抗CD19单链抗体的N端还含有信号肽，优选地，所述信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第1-22位氨基酸所示；

所述抗CD19单链抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第23-129位氨基酸所示；

所述抗CD22单链抗体的重链可变区的氨基酸序列可如SEQ ID NO:2第135-258位氨基酸所示；

所述抗CD22单链抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第277-383位氨基酸所示；

所述抗CD19单链抗体的轻链可变区的氨基酸序列可如SEQ ID NO:2第389-508位氨基酸所示；

所述人CD8铰链区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第511-557位氨基酸所示；

所述人CD8跨膜区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第558-579位氨基酸所示；

所述人41BB胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第580-626位氨基酸所示；

所述人CD3ζ胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第627-738位氨基酸所示。

5.一种核酸构建物，所述核酸构建物含有权利要求1-2中任一项所述的多核苷酸序列；

优选地，所述核酸构建物为载体；

更优选地，所述核酸构建物为逆转录病毒载体，含有复制起始位点，3’LTR，5’LTR，以及权利要求1-2中任一项所述的多核苷酸序列。

6.一种逆转录病毒，所述逆转录病毒含有权利要求5所述的核酸构建物，优选含有所述载体，更优选含有所述逆转录病毒载体。