[发明专利]端粒酶活性检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种端粒酶活性检测试剂盒，其特征在于，包括端粒酶底物引物、dNTPs、端粒酶逆转录缓冲液、氯化血红素、过氧化氢、量子点比率荧光探针，其中所述量子点比率荧光探针包含量子点部分和染料部分，所述量子点部分和所述染料部分发射不同颜色的荧光，且过氧化氢能淬灭所述量子点部分发射的荧光但不能淬灭所述染料部分发射的荧光，所述量子点部分和所述染料部分通过硫代磷酸酯修饰的DNA复合，所述量子点部分为CdZnTeS量子点，所述染料部分为Rox，其中所述端粒酶活性检测试剂盒包括试纸传感器，所述试纸传感器通过将试纸浸入量子点比率荧光探针溶液中并干燥而制得，所述量子点比率荧光探针溶液通过将所述量子点比率荧光探针溶于Tris缓冲液中形成。

2.根据权利要求1所述的端粒酶活性检测试剂盒，其特征在于，所述端粒酶底物引物如SEQ ID NO: 1所示，所述端粒酶逆转录缓冲液包含20 mM Tris-HCl pH=8.3, 1.5 mMMgCl₂, 63 mM KCl, 0.005% Tween 20, 0.1 mg/mL BSA。

3.根据权利要求1所述的端粒酶活性检测试剂盒，其特征在于，包括：

第一试剂容器，所述第一试剂容器包含所述端粒酶底物引物、所述dNTPs和所述端粒酶逆转录缓冲液；

第二试剂容器，所述第二试剂容器包含所述氯化血红素；

第三试剂容器，所述第三试剂容器包含所述过氧化氢；和

所述试纸传感器。

4.一种用于非诊断治疗目的的端粒酶活性定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）获取端粒酶样品；

（2）向所述端粒酶样品加入端粒酶底物引物、dNTPs和端粒酶逆转录缓冲液进行反应，形成端粒酶延伸反应产物，然后加入氯化血红素进行反应，形成氯化血红素/G-四链体；

（3）向步骤（2）得到的氯化血红素/G-四链体加入固定量的过氧化氢进行反应；

（4）通过将试纸浸入量子点比率荧光探针溶液中并干燥而制得试纸传感器，所述量子点比率荧光探针溶液通过将量子点比率荧光探针溶于Tris缓冲液中形成；其中所述量子点比率荧光探针包含量子点部分和染料部分，所述量子点部分和所述染料部分发射不同颜色的荧光，且过氧化氢能淬灭所述量子点部分发射的荧光但不能淬灭所述染料部分发射的荧光，所述量子点部分和所述染料部分通过硫代磷酸酯修饰的DNA复合，所述量子点部分为CdZnTeS量子点，所述染料部分为Rox；将步骤（3）中反应后的混合体系滴到所述试纸传感器上，观察所述量子点比率荧光探针的发射荧光颜色。

5.根据权利要求4所述的用于非诊断治疗目的的端粒酶活性定量检测方法，其特征在于，所述端粒酶底物引物如SEQ ID NO: 1所示，所述端粒酶逆转录缓冲液包含20 mM Tris-HCl pH=8.3, 1.5 mM MgCl₂, 63 mM KCl, 0.005% Tween 20, 0.1 mg/mL BSA。

6.根据权利要求4所述的用于非诊断治疗目的的端粒酶活性定量检测方法，其特征在于，还包括建立端粒酶溶液的浓度与发射荧光颜色的对应关系。

7.根据权利要求6所述的用于非诊断治疗目的的端粒酶活性定量检测方法，其特征在于，所述建立端粒酶溶液的浓度与发射荧光颜色的对应关系包括：提供一系列浓度的端粒酶溶液，所述一系列浓度的端粒酶溶液在反应后的一系列发射荧光颜色被拍摄制作成一系列颜色的标准色卡，所述标准色卡中的每种颜色对应相应的端粒酶溶液浓度。