[发明专利]一种血小板分离富集方法、血小板作用药物的试药方法及试药芯片

说明书

一种血小板分离富集方法、血小板作用药物的试药方法及试药芯片，涉及血小板检测领域。血小板分离富集方法是使血液样本在管道中流动，施加介电电泳力；在血小板中加入诱导剂；使混合物在管道中流动，施加介电电泳力，检测聚集血小板和血小板的数量，该血小板分离富集方法能够快速、有效分离出血液样本中的血小板。血小板作用药物的试药方法是在混合物中加入血小板作用药物；使药物作用后的混合物在管道中流动，施加介电电泳力，检测聚集血小板和血小板的数量，该血小板作用药物的试药方法能快速检测出血小板与药物作用后的聚集行为变化。血小板作用药物的试药芯片的结构简单、成本低，能够快速进行血小板作用药物的试药。

技术领域

本发明涉及血小板检测领域，且特别涉及一种血小板分离富集方法、血小板作用药物的试药方法及试药芯片。

背景技术

血小板作为外周血重要成分，参与机体内许多生理、病理过程。在凝血生理过程中，血管损伤处细胞外基质蛋白暴露在血液中，少量血小板将首先黏附在细胞外基质蛋白表面，随后血小板被激活，通过自分泌的二磷酸腺苷(ADP)和血栓素A2(TXA2)等凝血因子从血液中募集其他血小板，最终通过血小板的GPⅡb/Ⅲa受体和纤维蛋白原结合发生聚集反应。血小板黏附聚集功能抑制将导致出血风险，而功能亢进将增加动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、心肌梗死、卒中等血栓疾病风险。因此，测定血小板生理功能，特别是其聚集性，不仅有助于诊断某些先天性和获得性血小板缺陷所导致的出血性疾病，且在血栓疾病发病机制、临床诊断、抗血栓疗法、监测抗血小板药物浓度等研究中有重要意义。

目前，血小板聚集功能已成为临床的基础检测项目之一，现有检测技术和系统包括光电比浊法、全血电阻法、PFA-100血小板功能仪、 PL-11血小板分析仪、Verifynow系统及血栓弹力图仪等。其中PL-11 血小板分析仪可直接使用全血动态分析血小板聚集过程并能对血液细胞的多种组分(包括血小板和红细胞)进行定量分析。

为了有效、准确的获取个体患者的血小板作用药物的服药效果，需要检测个体患者血液中的血小板与药物作用后的聚集行为变化。而上述现有的检测技术和系统都非常复杂，成本高，只适合专业检测部门，显然不适合快速进行试药过程。另外，为了快速试药，需要先对将个体患者血液中的血小板快速分离出来，但是现有的血小板分离方法及设备同样存在复杂、成本高，易破坏血小板的缺陷。

因此，需要一种能够快速分离出血液中的血小板，进而进行试药的方法和设备。

发明内容

本发明的目的在于提供一种血小板分离富集方法，此方法能够快速、有效分离出血液样本中的血小板。

本发明的另一目的在于提供一种血小板作用药物的试药方法，能快速检测出血小板与药物作用后的聚集行为变化。

本发明的另一目的在于提供一种血小板作用药物的试药芯片，其结构简单、成本低，能够快速进行血小板作用药物的试药。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

本发明提出一种血小板分离富集方法，其包括以下步骤：

使血液样本在管道中流动，对管道内的血样样本施加介电电泳力，使血液样本中的血小板与其他粒子分开，检测血小板的数量；

在血小板中加入诱导剂，使血小板充分聚集，得到聚集血小板及血小板的混合物；

使聚集血小板及血小板的混合物在管道中流动，对管道内的混合物施加介电电泳力，使混合物中的聚集血小板与血小板分开，检测聚集血小板的数量和血小板的数量。

进一步地，在本发明较佳实施例中，检测血小板/聚集血小板的数量的方法为：采用电化学阻抗法，检测血小板/聚集血小板的电化学阻抗及频率，根据血小板/聚集血小板的电化学阻抗及频率与血小板/聚集血小板数量之间的对应关系，得到血小板/聚集血小板的数量。