[发明专利]黑果小檗总花色苷提取物及其纯化分离方法

权利要求书

1.一种黑果小檗总花色苷提取物，其特征在于按下述方法得到：第一步，在室温条件下，将所需量的黑果小檗果实粉碎后取浆液，用含酸乙醇溶液提取四次，过滤，合并滤液并旋蒸得到总花色苷浓缩液，其中，黑果小檗果实浆液与含酸乙醇溶液的质量浓度之比为1:25；第二步,用pH为1.0至5.0的缓冲溶液稀释总花色苷浓缩液，得到pH为1.0至3.0、质量浓度为0.1mg/mL至1.5mg/mL的总花色苷稀释液；第三步，将总花色苷稀释液，以0.5mL/min至3mL/min的流速通过预处理后的大孔树脂，每50mL的总花色苷稀释液采用1g预处理后的大孔树脂吸附，大孔树脂吸附总花色苷稀释液后，过滤吸附总花色苷稀释液饱和后的大孔树脂，去除滤液，用蒸馏水洗涤去除滤液的大孔树脂后并抽干；第四步，将乙醇溶液加入到抽干的大孔树脂中，以1mL/min至3mL/min的流速对抽干的大孔树脂进行洗脱后，收集乙醇洗脱液，将乙醇洗脱液旋蒸浓缩、冷冻干燥后，得到黑果小檗总花色苷提取物，其中，乙醇溶液的pH为1.0至3.0，体积百分比浓度为20％至95％。

2.根据权利要求1所述的黑果小檗总花色苷提取物，其特征在于提取时用的含酸乙醇溶液的体积百分比浓度为60％至80％，含酸乙醇溶液所含的酸为盐酸，盐酸的体积百分比浓度为0.8％，每次提取时间为20min至30min；或/和，大孔树脂为NKA-9大孔树脂、X-5大孔树脂、AB-8大孔树脂、HPD-100大孔树脂、HPD-300大孔树脂、XDA-6大孔树脂、XDA-7A大孔树脂、D101大孔树脂、XAD-16大孔树脂、XAD-7HP大孔树脂中的一种。

3.根据权利要求1或2所述的黑果小檗总花色苷提取物，其特征在于滤液旋蒸时，旋蒸仪的温度为30℃至40℃；或/和，乙醇洗脱液旋蒸浓缩时，旋蒸仪的温度为30℃至40℃。

4.根据权利要求1或2或3所述的黑果小檗总花色苷提取物，其特征在于缓冲溶液为盐酸-氯化钾缓冲液和醋酸-醋酸钠缓冲液中的一种。

5.根据权利要求1或2或3或4所述的黑果小檗总花色苷提取物，其特征在于黑果小檗果实浆液用含酸乙醇溶液提取时，采用超声提取，超声提取的频率为3KHz。

6.根据权利要求1或2或3或4或5所述的黑果小檗总花色苷提取物，其特征在于大孔树脂吸附总花色苷稀释液时，在25℃的水浴中恒温振荡20小时至24小时，其中，振荡频率为135r/min。

7.根据权利要求1或2或3或4或5或6所述的黑果小檗总花色苷提取物，其特征在于乙醇溶液洗脱抽干树脂时，在25℃的水浴中恒温振荡20小时至24小时，其中，振荡频率为135r/min。

8.根据权利要求1或2或3或4或5或6或7所述的黑果小檗总花色苷提取物，其特征在于乙醇洗脱液冷冻干燥的温度为-40℃至-50℃。

9.根据权利要求1或2或3或4或5或6或7或8所述的黑果小檗总花色苷提取物，其特征在于大孔树脂的预处理过程为：第一步，用体积百分比浓度为95％的乙醇溶液浸泡大孔树脂24h后，将大孔树脂湿法装柱；第二步，乙醇溶液第一次洗涤大孔树脂，至洗涤液与水混合不产生白色浑浊时，用蒸馏水第二次洗涤大孔树脂，至洗涤液无乙醇味；第三步，用体积百分比为2％的氢氧化钠溶液第三次洗涤无乙醇味的大孔树脂后，用蒸馏水第四次洗涤大孔树脂，至洗涤水的酸碱度为中性时，用体积百分比为5％的盐酸溶液第五次洗涤大孔树脂，其中，大孔树脂与氢氧化钠溶液的体积比为1:4，大孔树脂与盐酸溶液的体积比为1:4；第四步，盐酸溶液洗涤后的大孔树脂，用蒸馏水洗涤至洗涤液酸碱度为中性时，将洗涤后的大孔树脂置于体积百分比为95％的乙醇溶液中得到预处理后的大孔树脂。

10.一种根据权利要求1或2或3或4或5或6或7或8或9所述的黑果小檗总花色苷提取物的纯化分离方法，其特征在于按照下述步骤进行：第一步，在室温条件下，将所需量的黑果小檗果实粉碎后取浆液，用含酸乙醇溶液提取四次，过滤，合并滤液并旋蒸得到总花色苷浓缩液，其中，黑果小檗果实浆液与含酸乙醇溶液的质量浓度之比为1:25；第二步,用pH为1.0至5.0的缓冲溶液稀释总花色苷浓缩液，得到pH为1.0至3.0、质量浓度为0.1mg/mL至1.5mg/mL的总花色苷稀释液；第三步，将总花色苷稀释液，以0.5mL/min至3mL/min的流速通过预处理后的大孔树脂，每50mL的总花色苷稀释液采用1g预处理后的大孔树脂吸附，大孔树脂吸附总花色苷稀释液后，过滤吸附总花色苷稀释液饱和后的大孔树脂，去除滤液，用蒸馏水洗涤去除滤液的大孔树脂后并抽干；第四步，将乙醇溶液加入到抽干的大孔树脂中，以1mL/min至3mL/min的流速对抽干的大孔树脂进行洗脱后，收集乙醇洗脱液，将乙醇洗脱液旋蒸浓缩、冷冻干燥后，得到黑果小檗总花色苷提取物，其中，乙醇溶液的pH为1.0至3.0，体积百分比浓度为20％至95％。