[发明专利]一种提高人类体外受精胚胎发育率的方法

说明书

本发明提供了一种提高人类体外受精胚胎发育率的方法，其特征在于，在人类卵母细胞常规培养液中加入中药单体制备体外受精培养液，来提高人类体外受精胚胎发育率。其中，所述的中药单体为黄芩苷、淫羊藿苷和川芎嗪中的任意一种，所述的中药单体与人类卵母细胞常规培养液的质量比（或体积比）范围为6.0ug/mL、2.0 ug/mL和3.0ug/mL。本发明通过研究标明，在常规培养液中加入中药单体成份黄芩苷制备的受精液，对人类卵母细胞胚胎发育具有良好的促进作用，在卵裂率和囊胚发育率等方面均好于未加中药成分的对照组。

技术领域

本发明属于再生医学领域，具体涉及一种提高人类体外受精胚胎发育率的方法。

背景技术

受精-胚胎移植(IVF-ET)又称“试管婴儿”，是将体内来源的精子和卵子在试管内发育成受精卵，然后再移植回母体子宫，以达到受孕目的的一种技术。是人类辅助生殖技术的主要手段。IVF技术经历了 30多年的发展，使得哺乳动物卵母细胞的成熟、受精以及胚胎的发育可在体外更加直观的进行研究，并得到了广泛的应用，为不孕不育症患者获得健康的后代作出了巨大贡献。

人类医学界著名的“胎源假说”认为：辅助生殖技术解决了人类诸多生育问题，但体外培养过程人为地引入了大量非生理性的操作，在生命形成过程的初始阶段，最关键、最易受外界影响的受精和胚胎早期发育阶段对生殖过程进行干预，势必会对配子和胚胎发育造成一定的影响。由于体内外发育环境的较大差异，体外培养条件的不适宜，使得人类体外受精(IVF)胚胎体外发育效率及质量远低于体内胚胎。迄今为止，体外受精胚胎的发育率仍然是亟待解决的问题，这主要与卵母细胞体外成熟质量密切相关。目前，体外受精技术主要采用完全成熟的卵母细胞，卵母细胞体外成熟是胚胎体外生产过程的关键环节，因为它决定卵母细胞的质量，影响胚胎的发育。而且人类卵母细胞体外成熟(IVM)体系仍不完善，导致人类卵母细胞的体外成熟质量不高、胚胎发育受阻，制约了其在生殖医学上的研究。

另体外受精胚胎的体外培养也是IVF技术的一个关键环节，也是卵母细胞体外成熟和体外受精技术最终效果的体现和检验。在体外受精后，受精卵在向囊胚发育过程中将需经历一系列重要的变化，包括合子的形成、第一次卵裂、胚胎基因组的激活、致密化以及形成囊胚。这一过程中，外界环境的变化会导致基因表达发生改变，从而影响胚胎的正常发育及质量。目前，哺乳动物早期胚胎的体外培养研究主要集中在改善培养液成分以满足不同发育阶段的胚胎营养需求。

近年来，诸多研究进展证明，中药单体成分有利于促进人类IVF胚胎体外发育，在卵母细胞成熟率、囊胚发育率、胚胎孵化率、孵化胚胎细胞数目和胚胎移植后出生率、成活率及移植效果方面都有显著效果。

发明内容

本发明的目的在于提供一种添加中药单体的人类卵母细胞体外受精液，以研究黄芩苷、淫羊藿苷和川芎嗪对人类体外受精胚胎体外发育效果的影响。

为了建立良好的人类胚胎体外培养体系，以体外成熟培养的人类卵母细胞为材料，分别研究中药单体成分黄芩苷、淫羊藿苷和川芎嗪对人类体外受精胚胎培养效果的影响。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

在人类卵母细胞常规培养液中加入中药单体制备受精液，所述的中药单体为黄芩苷、淫羊藿苷和川芎嗪中的任意一种。其中，当所述的中药单体为黄芩苷时，所述中药单体与人类卵母细胞常规培养液的质量比(或体积比)范围为4.5-7.5ug/mL；当所述的中药单体为淫羊藿苷时，所述中药单体与人类卵母细胞常规培养液的质量比(或体积比)范围为1.25-3.0ug/mL。当所述的中药单体为川芎嗪时，所述中药单体与人类卵母细胞常规培养液的质量比(或体积比)范围为2.0-3.5ug/mL。

上述方案中，人卵母细胞常规受精液为改良Tyrode's培养液。

本发明进一步提出了上述中药单体在制备用于提高人类体外胚胎发育的卵母细胞体外受精液中的应用，其中，所述的中药单体为黄芩苷、淫羊藿苷和川芎嗪中的任意一种。