[发明专利]一种冬虫夏草菌液体培养基及高效获得冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子的方法

说明书

本发明公开了一种冬虫夏草菌液体培养基及高效获得冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子的方法。所述的冬虫夏草菌液体培养基，每升含有土豆150～300g、蛋白胨10～30g、麦芽糖20～40g、硫酸镁0.5～1.5g、磷酸二氢钾1.5～30g、维生素B₁20～30g、大蜡螟幼虫研磨液5～10g，余量为水。本发明的冬虫夏草菌液体培养基和高效获得冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子的方法大大缩短了获得芽生孢子的培养时间，可以得到大量冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子，为冬虫夏草人工培育产业化发展提供技术支撑。

技术领域：

本发明属于微生物培养技术领域，具体涉及一种冬虫夏草菌液体培养基及高效获得冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子的方法。

背景技术：

冬虫夏草是冬虫夏草菌Ophiocordyceps sinensis(Berk)侵染蝙蝠蛾科Hepialidae幼虫形成的僵虫与真菌子座复合体，具有重要的药用和经济价值，与人参、鹿茸被誉为中华医学三大宝。由于其生境特殊(仅在高寒地区自然繁衍)，生长速度缓慢，周期较长，自然资源极为有限，有关部门已将冬虫夏草列为国家二级保护物种。

近年来，由于国内外对冬虫夏草的需求迅猛增长，资源面临枯竭。通过人工培育冬虫夏草既可以满足国民需求和市场需要，又能保护生物资源和生态环境。经过30多年的研究，中华被毛孢人工培养和寄主蝠蛾幼虫的规模化饲养技术均取得很大进展，但如何快速获得冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子，提高中华被毛孢侵染幼虫形成僵虫并长出子座的成功率，缩短子座培养时间是目前冬虫夏草人工培育产业面临的重要问题。

发明内容：

本发明的目的是为了克服现有技术中的缺陷，提供一种冬虫夏草菌液体培养基及高效获得冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子的方法。

本发明的第一个目的是提供一种冬虫夏草菌液体培养基，每升含有土豆150～300g、蛋白胨10～30g、麦芽糖20～40g、硫酸镁0.5～1.5g、磷酸二氢钾1.5～30g、维生素B₁20～30g、大蜡螟幼虫研磨液5～10g，余量为水。

所述的大蜡螟幼虫研磨液优选为大蜡螟5龄幼虫研磨液。

本发明的第二个目的是提供一种所述的冬虫夏草菌液体培养基的制备方法，每升培养基是通过以下方法配制的：称取150～300g去皮土豆，加水煮沸，过滤得到土豆液，再加入蛋白胨10～30g、麦芽糖20～40g、硫酸镁0.5～1.5g、磷酸二氢钾1.5～30g、维生素B120～30g和大蜡螟幼虫研磨液5～10g，加水定容至1000mL。

本发明的第三个目的是提供一种高效获得冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子的方法，包括以下步骤：将中华被毛孢菌丝块接种到所述的冬虫夏草菌液体培养基中，于12±3℃，转速为80～120转/分，黑暗条件下培养30天，获得冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子。

所述的菌丝块优选为表面粘液状的菌丝块。

本发明的培养基和方法大大缩短了获得芽生孢子的培养时间，可以得到大量冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子，为冬虫夏草人工培育产业化发展提供技术支撑。

附图说明：

图1是本发明用于接种液体培养基的中华被毛孢菌落形态(菌落表面粘液状)。

图2是中华被毛孢菌落形态(菌落表面已长气生菌丝)。

图3是本发明培养得到的冬虫夏草菌(中华被毛孢)芽生孢子的镜检图(400×)。

图4是本发明制备的冬虫夏草菌(中华被毛孢)芽生孢子荧光28染色后的镜检图(400×)。

具体实施方式：

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1：