[发明专利]一种用于治疗肿瘤的香菇多糖粉体提取工艺

说明书

本发明公开了一种用于治疗肿瘤的香菇多糖粉体提取工艺，包括：取1kg香菇，加水10L，水煮，加入3倍体积95％乙醇沉淀，获得香菇粗多糖，将粗多糖10g融于1L水中，收集沉淀，分装于10管50ml离心管中，分别加入11ml水，充分溶解，10000rpm离心速率下处理5分钟；得上清液，分装于50ml离心管中，分别加入11ml无水乙醇，后续醇沉上清液，收集醇沉上清液约200ml于1000ml烧杯中，加入无水乙醇500ml醇沉，收集沉淀于50ml离心管，溶于200ml水后用5％氢氧化钠处理，透析出去碱液后，真空低温冷冻干燥获得所述香菇多糖粉体。本发明的提取工艺获得目标组分，以解除免疫负调控细胞对免疫效应细胞的抑制，恢复免疫监视的单一组分为目标，使获得的产品在改善肿瘤微环境方面更显著。

技术领域

本发明涉及一种治疗肿瘤的香菇多糖，更具体地说，它涉及一种用于治疗肿瘤的香菇多糖粉体提取工艺。

背景技术

鉴于肿瘤的高发，而预防、治疗手段有限，常规治疗也有一定的局限性，目前市场上迫切需要一种来源于食品的制剂，起到治疗肿瘤的功效。

目前缺乏改善癌症微环境的产品，现有产品的目标多以直接杀伤肿瘤细胞为主，在杀伤肿瘤细胞的同时，往往会杀伤免疫效应和免疫记忆细胞，或者从正向免疫效应为目标，加强效应性免疫细胞，即常说的提高免疫力，而现代肿瘤免疫学研究表明，机体内有正常免疫效应细胞，肿瘤细胞还是会发生免疫逃逸，究其原因，是因为有一群免疫抑制性细胞阻碍了免疫细胞细胞发挥免疫监视，而解除这群免疫抑制性细胞的负向效应，对于肿瘤预防和辅助治疗具有重要意义。

现有用于预防肿瘤的香菇多糖提取工艺为粗多糖，粗多糖中的成分未进行细分，而本发明对香菇粗多糖的成分进行了细分，以改善肿瘤微环境的单一组分为目标，效果更显著。

发明内容

本发明提供一种用于预防肿瘤的香菇多糖粉体提取工艺，此香菇多糖提取工艺，对现有技术中粗多糖中的成分进行细分，筛选出具有改善肿瘤微环境的组分，恢复机体抗肿瘤免疫力，预防肿瘤发生免疫逃逸。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种用于治疗肿瘤的香菇多糖粉体提取工艺，包括以下步骤：

步骤一、取1kg香菇，加入水10L，沸水提取，时间3小时，共计提取2次。每次的提取液经过滤后合并，加热浓缩至小体积，对流动水透析48小时，透析内液浓缩后离心，1：1(v/v)加入30％的三氯乙酸溶液，在4℃条件下反应4小时，加10％NaOH溶液中和至PH7左右，扎袋对流动水透析48小时，透析内液浓缩后离心，上清液加入3倍体积的95％乙醇，静置过夜。离心收集沉淀，于40℃干燥，得粗多糖。

步骤二、将步骤一提取的粗多糖10g融于1L水中，加入1L乙醇(50％醇沉)，4℃静置过夜；

步骤三、将步骤二中溶液分装至50ml的离心管中，在10000rpm离心速率下处理5分钟；

步骤四、收集经步骤三中的沉淀，分装于10管50ml离心管中，分别加入11ml水，充分溶解，10000rpm离心速率下处理5分钟；得上清液，分装于50ml离心管中(共5管)，分别加入11ml无水乙醇(30％醇沉)，充分振荡，10000rpm离心5分钟；

步骤五、将步骤四的上清液分装于50ml离心管(共5管)，分别加入6ml乙醇(40％醇沉)，4℃静置过夜；

步骤六、收集步骤五的醇沉上清液于50ml离心管(5管)，分别加入4ml乙醇(50％醇沉)，10000rpm离心5分钟；

步骤七、收集步骤六的醇沉上清液约200ml于1000ml烧杯中，加入无水乙醇500ml醇沉，收集沉淀于50ml离心管；

步骤八，将步骤七的沉淀溶于200ml水中，加入5％氢氧化钠溶液，处理30分钟，10000rpm，离心5分钟，收集沉淀，