[发明专利]一种用于预防和治疗肿瘤的雪菊多糖粉体提取工艺有效
申请号: | 201810515131.1 | 申请日: | 2018-05-25 |
公开(公告)号: | CN108752494B | 公开(公告)日: | 2021-04-13 |
发明(设计)人: | 陶宁;杨小芳;乔立涛 | 申请(专利权)人: | 浙江丹晖生物科技有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 北京久维律师事务所 11582 | 代理人: | 邢江峰 |
地址: | 310000 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 预防 治疗 肿瘤 多糖 提取 工艺 | ||
1.一种用于预防和治疗肿瘤的雪菊多糖粉体提取工艺,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、取0.5kg新疆和田雪菊,加入水5L,沸水提取,时间3小时,共计提取3次,每次的提取液经过滤后合并,加热浓缩至小体积,脱脂棉过滤,滤液离心,4000转,15分钟,收集上清,上清用80%乙醇沉淀,沉淀用去离子水复溶,对流动水透析48小时,去掉12KDa以下部分,透析内液冻干,得到CTCP-粗多糖,得率为1.4%;
步骤二、将步骤一提取的粗多糖溶于水中,室温搅拌,离心5000转,15分钟,收集上清,过柱,柱子为阴离子交换柱,填料为DEAE-葡聚糖凝胶,凝胶柱的直径为5.0mm,柱长为20cm,依次用水、氯化钠和氢氧化钠洗脱,氯化钠依次为0.1mol/L、0.2mol/L、0.3mol/L、0.5mol/L、1.0mol/L,氢氧化钠为0.2mol/L,洗脱组分依次命名为CTN、CTA1、CTA2、CTA3、CTA4、CTA5和CTA6,均为粗多糖的可溶性成分;
步骤三、取500mg主成分CTA3过柱分离提纯,柱子为琼脂糖凝胶-6B,采用0.1mol/L氯化钠洗脱,得到3个组分,分别为CTA3-1,CTA3-2和CTA3-3,浓缩和透析后,将主要组分CTA3-3过柱纯化,柱子为Sephacryl S-300HR,采用0.1mol/L氯化钠洗脱,得到一个多糖组分,命名为CTAP-3,得率为122.7mg。
2.根据权利要求1所述的一种用于预防和治疗肿瘤的雪菊多糖粉体提取工艺,其特征在于,所述步骤二中的洗脱组分所占百分比为:CTN为3.9%,CTA1为21.2%,CTA2为5.7%,CTA3为48.3%,CTA4为1.4%,CTA5为2.4%,CTA6为1.1%。
3.根据权利要求1所述的一种用于预防和治疗肿瘤的雪菊多糖粉体提取工艺,其特征在于,所述步骤三中Sephacryl S-300HR柱子规格:直径2.2mm,柱长90cm。
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