[发明专利]一种浒苔碱溶性多糖的制备方法

说明书

本发明公开了一种浒苔碱溶性多糖的制备方法，包括下列步骤：a.将新鲜的浒苔用清水洗涤，除去泥沙，45℃烘干，干燥后的样品经粉碎机粉碎，过40目筛。b.超声。c.热回流。d.酶解。e.浸提。f.浓缩纯沉。g.洗涤。h.纯化。本发明的有益效果：本发明的整个工艺过程中无污染物排放，适合于大规模生产，有益于浒苔资源的开发利用。具有该步骤简单，成本低，可操作性强，产量高的优点，易于工业化生产。浒苔碱性多糖的提取率为16.38%，较文献报道的13.42%显著提高。

技术领域

本发明涉及一种浒苔碱溶性多糖的制备方法。属于海洋微藻养殖领域。

背景技术

浒苔（Enteromotpha）又称苔条，隶属于绿藻门（Chlorophyta）石莼目（Ulvales）石莼科（Ulvaceae）浒苔属（Enteromotpha），常见的种类有绿潮浒苔、缘管浒苔、扁浒苔、条浒苔和肠浒苔等。在我国南北方各海区均有分布，属东海海域优势种。浒苔营养丰富，富含碳水化合物、氨基酸，铁含量是我国食物之最，自古以来浒苔就是我国沿海居民食用和药用藻类。近年来，由于浒苔的大量繁殖，破坏了海洋环境的生态平衡，甚至造成严重的“绿潮”危害，因此如何更好的利用这种海洋资源，变废为宝成为研究开发的热点领域。

浒苔多糖是浒苔主要活性成分之一，据报道，浒苔多糖具有免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、降血脂等多种生物学活性。因此，研究浒苔多糖的提取工艺，对于有效利用浒苔资源具有重要的意义。目前，从浒苔中提取多糖的常用方法是溶液提取法、酶辅助提取法和物理辅助提取法，物理辅助提取法主要是超声波辅助提取法和微波辅助提取法。但上述方法或成本过高，或步骤繁琐复杂，不适合工业化生产。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种浒苔碱溶性多糖的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

本发明提供的浒苔碱溶性多糖的制备方法，包括下列步骤：

a. 将新鲜的浒苔用清水洗涤，除去泥沙，45℃烘干，干燥后的样品经粉碎机粉碎，过40目筛。

b.浒苔干燥粉末与10倍体积的80%乙醇溶液混合后，60℃超声处理1h，反应结束后过滤，烘干。

c. 采用50倍体积的水热回流，90℃反应2小时，收集残渣，并用热水洗涤3次。

d. 酶解：将得到的残渣以重量比1:40的料液比加入复合酶液，调节pH8.0在55℃下反应80min。

e. 浸提：酶解反应结束后，5000rpm下离心10min,得到沉淀；将沉淀与10倍体积的0.02M NaOH溶液混合，水浴80℃，提取40min，5000rpm离心10min，收集上清液，对沉淀重复提取2次，并合并3次上清液。

f. 浓缩纯沉：将得到的上清液在50℃下减压浓缩蒸馏至1/4体积，调节pH至7，加入3倍体积的95%的乙醇溶液，边加边搅拌，放置4h后，5000rpm离心10min，收集沉淀。

g. 洗涤：将沉淀用95%的乙醇洗涤后，得到浒苔碱溶性粗多糖。

h. 纯化：将得到的碱溶性粗多糖加入4倍 0.02M NaOH溶液溶解；用sevag法除蛋白；调pH至8，在50℃下滴加入10%的H₂O₂脱色10min；加入3倍体积95%乙醇，离心，收集沉淀3次，冷冻干燥得到浒苔碱溶性多糖。

本发明用的复合酶包括纤维素酶和中性蛋白酶，两者的重量比例是0.5-3：1。进一步优化的结果是纤维素酶和中性蛋白酶，两者的重量比例是1：1。

本发明的有益效果：