[发明专利]重金属汞离子的检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种重金属汞离子的检测试剂盒，含有试纸条和经超顺磁性荧光复合粒子标记的第一抗体；所述第一抗体能够特异结合重金属汞离子；

所述试纸条由依次连接并固定于基底层上的样品垫、设有检测线和质控线的包被膜，以及吸水垫组成；

所述检测线和所述质控线相互分离；

所述检测线处包被有载体蛋白偶联重金属汞离子抗原；

所述质控线处包被有二抗，所述二抗为抗所述第一抗体的抗体；

所述检测线位于所述包被膜靠近所述样品垫的一端；

所述质控线位于所述包被膜靠近所述吸水垫的一端。

2.根据权利要求1所述的产品，其特征在于：所述经超顺磁性荧光复合粒子标记的第一抗体为将所述第一抗体与所述超顺磁性荧光复合粒子通过肽键共价结合形成的聚合体；

和/或

所述第一抗体为能够特异结合重金属汞离子的多克隆抗体或单克隆抗体；

和/或

所述载体蛋白偶联重金属汞离子抗原是通过将所述载体蛋白偶联氨基功能化EDTA并螯合重金属汞离子得到的；

和/或

所述样品垫为玻璃纤维素膜，所述包被膜为硝酸纤维素膜。

3.根据权利要求1或2所述的产品，其特征在于：所述超顺磁性荧光复合粒子为超顺磁性荧光复合微球；

进一步地，所述超顺磁性荧光复合微球为Fe₃O₄磁性纳米粒子与CdSe/ZnS荧光材料经包覆SiO₂并表面修饰羧基功能化基团的复合微球；和/或

所述超顺磁性荧光复合微球的直径为10-500nm，优选地，为50-400nm，更优选地，为100-300nm；

所述超顺磁性荧光复合微球的磁饱和强度为40～120emu/g，对应的外磁场响应速度为30～120秒；进一步地，所述超顺磁性复合粒子的磁饱和强度为40～80emu/g，对应的外磁场响应速度为30～60秒；

所述超顺磁性荧光复合微球功能化基团羧基的含量为40～400μmol/g；进一步地，所述羧基的含量为60～100μmol/g。

4.根据权利要求1-3中任一所述的产品，其特征在于：

所述载体蛋白偶联重金属汞离子抗原按照包括如下步骤的方法制备：

(a1)将所述载体蛋白溶于浓度为0.05M、pH值为9.6的硼酸盐缓冲液中，得到载体蛋白溶液；

所述载体蛋白和所述浓度为0.05M、pH值为9.6的硼酸盐缓冲液的配比为100mg：10mL；

(a2)将Aminobenzyl-EDTA溶于1M盐酸中，然后0℃搅拌下滴加浓度为0.2M的NaNO₂溶液，反应，得到Aminobenzyl-EDTA溶液；

所述Aminobenzyl-EDTA、所述1M盐酸和所述浓度为0.2M的NaNO₂溶液的配比为9mg：4mL：150μL；

(a3)将步骤(a2)得到的所述Aminobenzyl-EDTA溶液滴加到步骤(a1)得到的所述载体蛋白溶液中，并用调节pH至8.5，反应，然后调节pH至7.5，加入浓度为0.5M的重金属汞离子溶液，再反应，得到反应液；

所述Aminobenzyl-EDTA溶液、所述载体蛋白溶液、所述浓度为0.5M的重金属汞离子溶液的配比为4.15mL：10mL：90μL；

和/或

所述经超顺磁性荧光复合粒子标记的第一抗体按照包括如下步骤的方法制备：

(b1)将每5mg超顺磁性荧光复合粒子、0.96mg1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺、1.15mg N-羟基丁二酰亚胺和1mL浓度为0.1M、pH值为4.7的2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液混匀，反应，得到活化后磁性粒子；

(b2)将每5mg步骤(b1)得到活化后磁性粒子、0.1-0.2mg所述第一抗体和0.8mL浓度为50mM pH为8.5的硼砂缓冲液混匀、反应，得到含有偶联后磁性粒子的反应液；

(b3)向步骤(b2)得到的反应液中加入BSA混匀得到混合液、反应，得到含有封闭后磁性粒子的反应液；所述BSA在所述混合液中的质量百分含量为1％。