[发明专利]长期基因组DNA的保存方法及试剂盒在审
申请号: | 201810516878.9 | 申请日: | 2018-05-25 |
公开(公告)号: | CN108410862A | 公开(公告)日: | 2018-08-17 |
发明(设计)人: | 朱倩倩;刘志;常小勇;刘兵;陈兰群;崔良红;夏正祥;陆德权 | 申请(专利权)人: | 安康(上海)生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 上海助之鑫知识产权代理有限公司 31328 | 代理人: | 陈详 |
地址: | 201203 上海市浦东新区自由*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因组DNA 保存 长期保存 目的基因 试剂盒 吸附 洗涤去除杂质 基因组总DNA 遗传多样性 方法使用 固相材料 固相载体 理化性质 生物特性 去除 | ||
本发明提供了长期基因组DNA的保存方法及试剂盒,具体地本发明提供的基因组DNA的长期保存方法包括步骤:固相载体吸附目的基因,洗涤去除杂质,干燥去除液体成分,从而实现对基因组DNA的长期保存。使用本发明的方法保存基因组DNA,保存方法的长期预期有效保存时间可达百年。根据本发明的方法使用固相材料吸附保存基因组总DNA,不会影响基因组DNA结构的完整性、理化性质、及其生物特性,而且可以保持目的基因的遗传多样性,预期有效保存时间可达百年以上。
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体地说,本发明涉及一种长期基因组DNA的保存方法及试剂盒。
背景技术
随着全基因组测序技术的成熟,2009年Nature发表了两篇论文,其中一篇对肺癌细胞和皮肤细胞进行了全序列测定,经序列比对发现肺癌细胞存在22910个突变;另一篇对黑色素瘤细胞与淋巴细胞进行了全序列测定,经序列比对发现黑色素瘤细胞存在33345个突变(A small-cell lung cancer genome with complex signatures of tobaccoexposure.Nature.2010Jan 14;463(7278);A comprehensive catalogue of somaticmutations from a human cancer genome.Nature.2010Jan 14;463(7278))。越来越多的研究证明,多种疾病特别是肿瘤,都是由于体细胞突变改变了细胞的性能,进而又改变了组织和器官的性能,导致出现疾病症状。因此,对体细胞的突变进行监测,对治疗和预防疾病的发生具有重要意义。
尽管全基因组测序技术发展非常迅速,检测费用也在逐步降低,但是现阶段的全基因组测序费用仍然非常高,远远超出了普通人群的可承受范围。而且,随着基因领域的研究逐渐深入,越来越多的基因改变现象被发现并证明和疾病相关,比如DNA甲基化修饰、DNA骨架硫酰化修饰等。这些研究进展表明,基因的复杂程度远超目前的预期,现有的技术手段很难对全基因组层面的变化进行全面的检测。
目前一种解决方案是,以较低的成本将基因样本保存起来,待将来需要时将基因样本取出进行检测。有预测表明,至2025年婴儿出生时进行基因测序将成为常规检测项目之一。因此,随着基因检测技术的进步,预计在不久的将来,基因检测的费用将会大幅度降低到全民可以承受的范围。
目前,已有许多专业的基因保存公司开展个人基因样本的保存服务,保存的基因组DNA可以长期维持其理化性质及生物学活性的稳定。现有的技术中,为保持基因结构的完整性和理化性质的稳定性,大都需要将分离获得的基因组DNA样本存贮在超低温条件下,基因保存条件苛刻,因而成本较高。因此,本领域技术人员致力于开发能够在常温下保存基因的技术,以进一步降低基因保存的成本,同时确保基因组DNA结构的完整性和理化性质的稳定性,以避免基因组信息的丢失或变化。
发明内容
本发明的目的在于提供一种基因组DNA的长期保存方法、试剂盒及其应用。
在本发明的第一方面,提供了一种基因组DNA的长期保存方法,所述方法包括步骤:
(1)固相载体吸附
提供待保存的基因组DNA,将所述基因组DNA加入固相吸附溶液中充分混匀获得混合液;其中,所述固相吸附溶液包括固相吸附载体、PEG、和NaCl;
(2)洗涤
离心步骤(1)中获得的混合液,去除上清液;加入有机溶剂洗涤沉淀,离心后去除上清液,加入有机溶剂混匀;
(3)干燥
将步骤(2)获得的液体转移至保存管中,干燥去除液体成分,从而实现对基因组DNA的长期保存。
在另一优选例中,所述固相吸附载体为纳米二氧化硅微球。
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