[发明专利]茚嗪氟草胺及其代谢物的高效液相色谱串联质谱分析方法

权利要求书

1.一种土壤中茚嗪氟草胺及其四种代谢物的高效液相色谱串联质谱分析方法，其特征在于包括以下步骤：

一、用高效液相色谱串联质谱法建立已知浓度梯度的茚嗪氟草胺及其四种代谢物的土壤基质标准工作曲线，所述标准工作曲线的建立包括以下步骤：

(1)制备土壤空白基质提取净化液

称取2.00g经测定不含茚嗪氟草胺及其四种代谢物的空白土壤样品，加入10mL水和10mL乙腈，混匀，加入无水硫酸镁4g和氯化钠1g，混匀，振荡提取30min后，5000rpm离心5min，取上清液；

取5mL上述上清液，放入预先加有50mg硅胶和150mg十八烷基键合硅胶吸附剂粉末的离心管中，混匀，10000rpm离心2min，离心后移取2mL上清液至刻度试管中，在40℃水浴中将上清液用氮气缓慢吹至50μL，再加入乙腈定容至1mL，过0.22μm滤膜，得到用于配制茚嗪氟草胺及其四种代谢物的土壤空白基质提取净化液；

(2)以得到的土壤空白基质提取净化液为溶剂配制茚嗪氟草胺及其四种代谢物的基质混合标准工作溶液；

(3)用高效液相色谱串联质谱法测定所述茚嗪氟草胺及其四种代谢物的土壤基质混合标准工作溶液中各农药组分的提取离子峰面积，以浓度为横坐标，以提取离子峰面积为纵坐标绘制出茚嗪氟草胺和四种代谢物农药的标准工作曲线；

二、测定土壤样品中茚嗪氟草胺及其四种代谢物的残留量，检测方法包括以下步骤：

(1)对土壤样品进行提取；称取2.00g土壤样品，加入10mL水，再加入10mL乙腈，混匀；再加入4g无水硫酸镁和1g氯化钠，混匀，振荡提取30min后，5000rpm离心5min，取上清液；

(2)对待净化的土壤样品提取液进行净化；取5mL上述上清液放入预先加有50mg硅胶和150mg十八烷基键合硅胶吸附剂粉末的离心管中，混匀，10000rpm离心2min，离心后移取2mL上清液至刻度试管中，在40℃水浴中将上清液用氮气缓慢吹至约50μL，再加入乙腈定容至1mL，上清液过0.22μm滤膜后，得到用于测定茚嗪氟草胺及其四种代谢物残留量的土壤样品提取净化液；

(3)用高效液相色谱串联质谱法测定所述土壤样品提取净化液中的茚嗪氟草胺及其四种代谢物残留量，记录提取离子色谱峰面积，基质外标法定量，得到所述土壤样品提取净化液中茚嗪氟草胺及其四种代谢物的测定值；再将所述测定值代入到定量计算公式中，最终得到土壤样品中待测茚嗪氟草胺和四种代谢物残留量；

定量计算公式：w＝(p×v×f)/m，式中：w为样品中待测茚嗪氟草胺和四种代谢物残留量，单位为mg/kg；p为测定值，单位为mg/L；m为称取的样品量，单位为g；v为定容体积，单位为mL；f为稀释倍数；

步骤一之(3)和步骤二之(3)中，色谱柱采用粒径2.7μm的反相C18色谱柱；以100％乙腈为A相，0.1％甲酸水溶液为B相，将A相与B相按体积比70：30混合作为流动相；流速设为0.4mL/min，柱温35℃；

步骤一之(3)和步骤二之(3)所涉及的质谱条件如下：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤一之(3)和步骤二之(3)所涉及的测定条件为：采用电喷雾(ESI)正离子源，多反应监测模式进行定量；气帘气压30psi，离子源温度550℃，毛细管电压5500V，雾化气压力50psi，加热辅助气压力50psi；进样量5μL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤一之(2)中，所述的基质混合标准工作溶液，其中茚嗪氟草胺及其四种代谢物的浓度范围是1-100μg/L。