[发明专利]一种基于HPLC-MSMS法测定氰霜唑及其代谢物残留量的方法

说明书

本发明所述基于HPLC‑MSMS法测定氰霜唑及其代谢物残留量的方法，利用分散固相萃取技术，建立了简便、快速并能有效避免样品中基质干扰的样品前处理方法，将此前处理方法结合HPLC‑MS/MS应用于马铃薯和土壤中氰霜唑及其代谢物CCIM的定性确证和定量检测中，能够快速的进行氰霜唑及其代谢物CCIM残留量的检测，整个方法的回收率较高，重复性好，且平均回收率达到86.1‑98.2％，平均相对标准偏差(RSD)为2.0‑6.9％，检出限低于1.5μg/kg，具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点；并且能满足美国、日本、欧盟、国际食品法典委员会(CAC)等相对应食品安全检测的0.02、0.05、0.01、0.01mg/kg残留限量，将为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。

技术领域

本发明属于农药残留量检测技术领域，具体涉及一种基于HPLC-MSMS法测定氰霜唑及其代谢物(CCIM)残留量的方法。

背景技术

近年来，以马铃薯疫病和葡萄霜霉病为代表的卵菌性病害迅速发展，给农业生产带来了巨大损失，另一方面，此类病原菌的抗性菌不断发展也成为妨碍其药性的一个大问题，使得常规药剂很难防治。

氰霜唑(cyazofamid)，商品名为科佳，其化学名称为4-氯-2-氰基-N,N-二甲基-5-对甲苯基咪唑-1-磺酰胺，英文化学名称为4-chloro-2-cyano-n,n-dimethyl-5-p-tolylimidazole-1-sulfonamide，CAS登录号为120116-88-3，分子量为324.786，是由日本石原株式会社研制，并与BASF共同开发的新一代苯基咪唑类杀菌剂，主要用于防治晚疫病、霜霉病、疫病等病害。氰霜唑由于作用机理独特，且活性高、又无交互抗性，能有效阻碍病原菌孢子萌发至孢子囊形成的各个生育阶段，进而有效的抑制病原菌的基数，从而达到预防和控制病害蔓延的目的。

研究发现，氰霜唑在使用后会迅速分解成4-氯-5-(4-甲苯基)-1H-咪唑-2-腈(CCIM)、4-氯-5-(4-甲苯基)-1H-咪唑-2-甲酰胺(CCIM-AM)和4-氯-5-(4-甲苯基)-1H-咪唑-2-羧酸(CCTA)等多个代谢产物。其中4-氯-5-(4-甲苯基)-1H-咪唑-2-腈(CCIM)是氰霜唑在植物体内的主要降解产物，并且与氰霜唑相比具有更高的毒性，其在农产品中的残留可能会带来更高的膳食摄入风险。

因此，我国《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》(GB 2763-2016)中规定，氰霜唑的残留定义为氰霜唑和CCIM残留量之和，并要求在进行市场监测时，应同时检测氰霜唑和CCIM的残留量，并基于此进行安全性评价。但由于目前尚缺乏对CCIM标准分析的方法，使得《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》(GB 2763-2016)中只对其制订了临时限量。

目前，国内尚无对于马铃薯和土壤中氰霜唑及其代谢物的残留量进行同时测定的方法。虽然现有文献报道中有过利用液相色谱法、电化学法和液质联用法的报道，但大多数都只测定了母体即氰霜唑的残留量，但并不能同时对其代谢产物CCIM进行测定。因此，亟需开发一种能够同时测定氰霜唑及其代谢物(CCIM)残留量的方法，尤其是马铃薯和土壤中氰霜唑及其代谢物的残留量的测定，对于马铃薯作物的种植而言，具有重要的意义。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种基于HPLC-MSMS法测定氰霜唑及其代谢物(CCIM)残留量的方法，以解决现有技术中无法同时对氰霜唑及其代谢物(CCIM)的残留量进行检测的问题。

为解决上述技术问题，本发明所述的一种基于HPLC-MSMS法测定氰霜唑及其代谢物残留量的方法，包括如下步骤：

(1)取待测样品加入提取溶剂进行涡旋提取，并进行盐析，固液分离并收集滤液，得到供试溶液；