[发明专利]含二元酸戊二胺盐的发酵液及方法及制得的二元酸戊二胺

权利要求书

1.一种二元酸戊二胺盐的酶转化液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

(a)发酵法制备二元酸铵盐溶液：以烷烃、脂肪酸、脂肪酸酯和脂肪酸盐中的一种或多种为底物发酵，在所述发酵时加入液氨和/或氨水，直至发酵结束，得到包括二元酸铵盐的发酵液；

(b)发酵法制备赖氨酸，得赖氨酸二元酸盐的发酵液；

其中，步骤(b)中所述发酵时，流加补料培养基，所述补料培养基包括底物，所述底物包括：葡萄糖和步骤(a)制得的二元酸铵盐；

步骤(b)中所述发酵的培养基包括：氮源、碳源、磷源、微量元素和生长因子，所述氮源包括玉米浆和步骤(a)制得的二元酸铵盐；

(c)步骤(b)中得到的赖氨酸二元酸盐经赖氨酸脱羧酶的脱羧反应，得到二元酸戊二胺盐的酶转化液。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(a)中，控制所述发酵过程中，菌体生长期控制pH为3.0-6.5，发酵产酸期控制pH为5.0-8.0。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(a)中，所述底物包括C9-C18的烷烃、直链饱和脂肪酸、直链饱和脂肪酸酯和直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种；优选包括C11-C16的正烷烃、直链饱和脂肪酸、直链饱和脂肪酸酯和直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种；所述二元酸铵盐的结构式为：H₄NOOC(CH₂)nCOONH₄和/或HOOC(CH₂)nCOONH₄，其中9≤n≤18；

所述二元酸铵盐包括癸二酸戊二胺盐、十二碳二羧酸戊二胺盐、十三碳戊二胺盐和十四碳戊二胺盐中的一种或多种。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(a)中，所述包括二元酸铵盐的发酵液中，所述二元酸铵盐的浓度为80-180g/L。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(a)中，所述包括二元酸铵盐的发酵液经进一步处理，得包括二元酸铵盐的发酵处理液。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(b)中，所述发酵培养基中的所述氮源的浓度为0.2％-1.5％；其中，所述二元酸铵盐的浓度为0.1％-1％；和/或，所述玉米浆的浓度为0.1％-0.5％，所述百分比为质量体积比，g/100mL；

步骤(b)中，所述发酵培养基中的碳源包括：葡萄糖；所述碳源的浓度为1％-6％；所述发酵培养基中的磷源包括：KH₂PO₄；所述磷源的浓度为0.02％-0.06％；所述发酵培养基中的微量元素包括：MgSO₄·7H₂O和/或MnSO₄·H₂O；所述微量元素的浓度为0.11％-0.55％；优选的，所述MgSO₄·7H₂O的浓度为0.1％-0.5％，和/或，所述MnSO₄·H₂O的浓度为0.01％-0.05％；所述发酵培养基中的生长因子包括：苏氨酸；所述生长因子的浓度为0.001％-0.03％，所述百分比为质量体积比，g/100mL。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(b)中，所述底物以补料培养基的方式加入；所述补料培养基中，所述二元酸铵盐的浓度为5％-60％；所述葡萄糖的浓度为10％-80％；所述发酵2-6h后，流加如上所述的补料培养基；所述百分比为质量体积比，g/100mL，所述ppm为g/10000mL。