[发明专利]一种检测苯二氮卓的FITC试纸条及其制备方法和应用方法在审
申请号: | 201810531071.2 | 申请日: | 2018-05-29 |
公开(公告)号: | CN108918896A | 公开(公告)日: | 2018-11-30 |
发明(设计)人: | 贾嘉;张振兴;吕小翠;赵琳;周亮;崔浩哲;张鹏;高翔 | 申请(专利权)人: | 郑州左安检测科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/94 | 分类号: | G01N33/94;G01N33/68;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/533;G01N21/64 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 赵娟 |
地址: | 450000 河南省郑州市高新技术*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 苯二氮卓 试纸条 制备方法和应用 结合物释放垫 反应膜 种检测 载体蛋白偶联物 底板 免疫层析技术 试纸条检测 羊抗鼠二抗 样品吸收垫 经济实用 快速检测 免疫分析 现场检测 准确定量 半抗原 检测线 灵敏度 吸水垫 质控线 包被 抗体 喷涂 检测 应用 | ||
1.一种检测苯二氮卓的FITC试纸条,包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板;其特征在于:所述结合物释放垫上喷涂有FITC标记的抗体;所述反应膜上包被有半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和羊抗鼠二抗的质控线。
2.根据权利要求1所述的FITC试纸条,其特征在于:所述样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜和吸水垫均粘贴在底板上且中任意相邻两个沿上下方向部分叠加,结合物释放垫的1/3-1/2被覆盖于样品吸收垫下。
3.根据权利要求1所述的FITC试纸条,其特征在于:所述结合物释放垫为玻璃纤维或聚酯材料。
4.根据权利要求1所述的FITC试纸条,其特征在于:所述反应膜为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。
5.一种制备权利要求1-4任一项所述FITC试纸条的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)用FITC标记苯二氮卓抗体,并将其喷涂在结合物释放垫上,以制备喷涂有苯二氮卓单克隆抗体-FITC标记物的结合物释放垫;
2)将半抗原-载体蛋白偶联物和羊抗鼠二抗分别喷涂于反应膜上作为检测线(T)和质控线(C);
3)将1)和2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。
6.根据权利要求5所述的制备FITC试纸条的方法,其特征在于:在步骤1)配置FITC溶液,然后加入苯二氮卓抗体进行共价偶联,结束后加入封闭缓冲液进行封闭,离心洗涤后4℃保存备用。
7.根据权利要求5所述的制备FITC试纸条的方法,其特征在于:在步骤1)中用喷膜仪将FITC标记的苯二氮卓的抗体喷涂至结合物释放垫上,每1 cm结合物释放垫喷涂1-9 μLFITC标记的苯二氮卓抗体,37℃干燥1-2h,置于干燥环境中备用。
8.一种应用权利要求1-4任一项所述检测苯二氮卓的FITC试纸条检测样品中苯二氮卓的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
1)将试纸条和待测样品恢复至室温;
2)开启免疫荧光分析仪,插入对应ID卡,读取标准曲线;
3)向试纸条的样品孔中加入待测样本60-120μL,反应5-10min后,将检测卡插入免疫荧光分析仪;
4)截留在检测线和质控线的FITC在最佳激发光下,发出强烈的荧光条带;
5)采用免疫层析分析仪读取检测线和质控线的荧光强度,并给出T/C值,分析仪可通过内置的标准曲线计算出样品中苯二氮卓的浓度,并判断阴阳性。
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