[发明专利]一种利用响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化的北沙参糖类化合物的提取方法

说明书

本发明属于化合物提取技术领域，具体涉及一种利用响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化的北沙参糖类化合物的提取方法。该方法通过以下步骤实现：（1）供试品溶液的制备；（2）标准曲线的制作；（3）实验设计与统计分析：①单因素试验②BBD‑响应面法优化分析；（4）遗传算法搜索分析；（5）直接搜索法搜索分析。本发明先采用BBD‑响应面优化法建立数学模型、获得目标函数后，使用遗传算法及直接搜索算法搜索各因素的精确最优值，将三种方法联合使用，以得到最佳优化结果，克服了现有的三种方法所存在的局限性。通过本发明优化的提取方法，能够实现对北沙参糖类化合物进行最大程度的提取，具有重要的研究意义。

技术领域

本发明属于化合物提取技术领域，具体涉及一种利用响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化的北沙参糖类化合物的提取方法。

背景技术

北沙参(Radix Glehniae)是伞形科植物珊瑚菜Glehnia littoralisFr. schmidtex Miq的干燥根。该品性甘，味微苦、微寒，有养阴清肺、益胃生津的作用，对于治疗肺热燥咳、热病津伤、唠嗽痰血、口渴等病症，是我省道地药材之一。北沙参的主要化学成分为糖类、香豆素类、磷脂、生物碱、氨基酸、挥发油、微量元素等。其中，糖类成分含量最高。另外，有研究表明北沙参糖类化合物可增强体液免疫和细胞免疫功能，具有免疫活性。因此，北沙参的主要成分（含量高）和重要免疫活性成分——糖类化合物具有重要的研究价值，对北沙参糖类化合物进行提取条件的优化研究成为必要。

文献《星点设计-响应面法优化热水浸提北沙参多糖的工艺研究》及《响应面法优化北沙参中糖类的提取工艺研究》提供了一种采用响应面法进行糖类化合物提取的工艺优化方法，但是，两种都方法都仅单纯的采用响应面法进行工艺优化，方法中各因素的波动对效应值的影响不明确，实际应用过程中，为了达到较高的效应值，需要对各因素进行精确的控制，增加了工艺控制的难度，目前存在的方法中，针对此类问题，还没有更好的解决方法。研究一种提取工艺更加优化的方法对于药材北沙参糖类化合物的提取具有重要的价值和意义。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种利用响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化的北沙参糖类化合物的提取方法。

本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：

本发明提供了一种利用响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化的北沙参糖类化合物的提取方法，包括以下步骤：

（1）供试品溶液的制备：称取50-200目北沙参粉末5g，以水料比10-60mL/g热水回流提取1-3次，提取时间为1-6h，提取液滤、合并后，离心，吸取上清液定容至500mL容量瓶，从中精密量取4mL定容至250mL容量瓶；充分混匀后从中精密吸取1mL入干燥洁净的具塞试管中，平行3支试管，继续进行蒽酮-硫酸反应，然后在590nm下测定供试品溶液的吸光度，每个样品测定两次，以吸光度的平均值计算提取率结果；

（2）标准曲线的制作：称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖0.5g，用纯净水稀释并定容至100mL容量瓶，从中吸取1mL再用纯净水定容至50mL容量瓶，得到浓度为0.1mg/mL的葡萄糖标准溶液；分别吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL葡萄糖标准溶液，每组平行3支试管，每支试管分别补加纯净水至液体总体积为1.2mL，同时取1.2mL纯净水作空白对照，分别加入4mL蒽酮试剂，迅速浸入冰水浴中冷却，充分振摇后，各试管同时浸入沸水浴中，管口加盖开始反应，反应10分钟，振摇均匀、冷却、室温放置10分钟后，获得标准样品，并在590nm检测波长下，测定各标准样品的吸光度;每个样品测定两次，以吸光度的平均值为纵坐标，以葡萄糖的浓度C（mg/mL）为横坐标，得葡萄糖的标准曲线方程；