[发明专利]一种基于糖蜜酒精废醪液培养微藻油脂积累的方法

权利要求书

1.一种利用糖蜜酒精废醪液培养单针藻生产生物柴油的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）制备培养基：将废醪液稀释，作为单针藻的基本培养基，向基础培养基中加入MgSO₄·7H₂O，调整pH值为6.8-7.1，制备得到培养基；

（2）产油微藻培养：将上述培养基在高温高压条件下灭菌，接入产油单针藻，藻细胞密度为1×10⁶-1.5×10⁶个/ml，然后加入用无水乙醇配制褪黑素母液，将褪黑素母液添加到已经稀释好的诱导藻液中使最终的褪黑素的浓度为10^-4μmol/L-1μmol/L，并将藻液置于强光照下培养；

（3）制备生物柴油：将培养到稳定期的微藻富集，提取油脂，制备得到生物柴油。

2.根据权利要求1所述利用糖蜜酒精废醪液培养单针藻生产生物柴油的方法，其特征在于：步骤（1）中废醪液稀释倍数为1550-1650倍。

3.根据权利要求1所述利用糖蜜酒精废醪液培养单针藻生产生物柴油的方法，其特征在于： MgSO₄·7H₂O的加入量为176.5-187.9mg/L。

4.根据权利要求1所述利用糖蜜酒精废醪液培养单针藻生产生物柴油的方法，其特征在于：所述步骤（2）中培养条件为：光照培养温度为23-26℃，光照强度为2500-4000lux，摇床转速为130-160r/min。

5.根据权利要求1所述利用糖蜜酒精废醪液培养单针藻生产生物柴油的方法，其特征在于：所述步骤（3）中制备生物柴油具体方法为：将培养液离心富集，离心条件为3500 r/min转速条件下离心10min，并以蒸馏水反复洗涤2次后冻干；添加冻干藻粉2倍重量的石英砂研磨20min后用体积比为2:1的氯仿-甲醇进行油脂提取，有机溶剂重复提取3次后收集有机相浓缩液，提取得到的油脂加入3%硫酸-甲醇的混合溶液（硫酸与甲醇的体积比为3:97）进行甲酯化制备得到生物柴油。