[发明专利]构建可变区序列文库试剂盒及可变区序列的测序方法有效
| 申请号： | 201810542557.6 | 申请日： | 2018-05-30 |
| 公开（公告）号： | CN108707653B | 公开（公告）日： | 2021-11-09 |
| 发明（设计）人： | 许林浩;黄智敏 | 申请（专利权）人： | 广州合谐医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6876 | 分类号： | C12Q1/6876;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 张春水;唐京桥 |
| 地址： | 510000 广东省广州市开发区广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 构建 可变 序列 文库 试剂盒 方法 | ||
1.一种构建可变区序列文库的试剂盒，其特征在于，包括以下引物：第一引物群、第一接头的引物和第二引物群；
其中，所述第一引物群包括特异性识别J区的所有亚型的编码序列的第一引物；
所述第一引物包括特异性识别J区的编码序列的核苷酸序列、校对随机段和第一接头，且所述特异性识别J区的编码序列的核苷酸序列、所述校对随机段和所述第一接头依次连接，所述第一引物群的校对随机段的序列互不相同；
所述第二引物群包括特异性识别V区的所有亚型的编码序列的第二引物；
所述第二引物包括特异性识别V区的编码序列的核苷酸序列和第二接头，且所述特异性识别V区的编码序列的核苷酸序列和所述第二接头相互连接；
所述第一接头的引物包括特异性识别第一接头的核苷酸序列；
还包括第一测序接头和第二测序接头，所述第一测序接头包括特异性识别所述第一接头的核苷酸序列和测序用接头，所述第二测序接头包括特异性识别所述第二接头的核苷酸序列和测序用接头，所述第一测序接头的核苷酸序列如SEQ ID NO：86所示，所述第二测序接头的核苷酸序列如SEQ ID NO：87所示；
还包括：编码可变区的DNA样本，所述编码可变区的DNA样本为T细胞受体的序列或B细胞受体的序列；
所述编码可变区的DNA样本为T细胞受体的序列，所述第一引物群的核苷酸序列如SEQID NO：1-13所示，所述第二引物群的核苷酸序列如SEQ ID NO：14-65所示；
所述编码可变区的DNA样本为B细胞受体的序列，所述第一引物群的核苷酸序列如SEQID NO：66-71 所示，所述第二引物群的核苷酸序列如SEQ ID NO：72-85所示。
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